川芎化学成分的气相-质谱与指纹图谱研究

摘要：目的：对川芎药材进行气质联用成分分析与指纹图谱的研究。方法：采用气质联用分析技术对川芎不同溶剂提取物进行了比较，并初步比较了川芎与当归的不同。结果：确定了气质联用分析条件，分析了川芎乙醚提取液的化学成分，建立了川芎的特征指纹图谱。结论：在此条件下，川芎图谱具有较好的特征性，可作为川芎专属性的指纹图谱。
Abstract：Objective To investigate into the fingerprint of Rhizoma Ligusticum chuanxiong Hort.. and analysis the components of chuanxiong. Method GC-MS was used to compare different extracts of chuanxiong. Chuanxiong and danggui. were also compared. Result The conditions for GC-MS of Rhizoma Ligusticum chuanxiong and the characteristic fingerprint was established. The components of chuanxiong’s ether extract were analyzed. Conclusion The chromatography can serve as the specific fingerprint for Rhizoma Ligusticum chuanxiong.
Key words：chuanxiong；GC/MS；fingerprint

中药川芎为伞形科植物川芎Ligusticum chuanxiong Hort.的干燥根茎，味辛、微苦、性温，具有活血祛瘀、行气开郁、祛风止痛之功效。临床上主要用于治疗心血管疾病、妇科疾病等。川芎挥发油的化学成分研究已有报道[1]。我们采用气相色谱/质谱联用技术对川芎的乙醚提取物进行了研究，确定了川芎的指纹图谱。

1 仪器与试药
1.1 仪器 HP-6890 GC/5973N MS气-质联用系统（美国安捷伦公司）
1.2 样品与试剂川芎药材购自南京市药材公司，经南京中医药大学陈建伟教授鉴定为Ligusticum chuanxiong Hort. 的根茎。乙醚，AR级，南京化学试剂厂；醋酸乙酯，AR级，上海荣润化工有限公司。

2 方法
2.1 供试品溶液取川芎饮片粉碎，过40目筛。称取川芎粉末2 g，置具塞三角烧瓶中，加乙醚10 mL，超声提取15 min，滤过，滤液挥去乙醚，残渣加醋酸乙酯定容至5 mL。
2.2 色谱条件色谱柱HP-5MS 5% Phenyl Methyl Siloxane 30 ｍ×0.25 ?m×0.25 mm；载气：He；流速：1ml.min-1；柱温：程序升温50℃——20℃/min——90℃——5℃/min——250℃；进样口温度：250℃；分流模式进样，分流比40:1，辅助线温度：280℃。离子源：230℃；四极杆：150℃；电离方式：ＥＩ；采集方式：扫描；扫描质量范围：35～500 mAU。

3 结果与讨论
3.1 药材提取方法比较川芎乙醚提取液、石油醚超声提取液、水蒸汽蒸馏正己烷萃取液，依上述条件由质谱检测器记录总离子流（TIC）色谱图，见图1。三者比较乙醚提取液杂质较少，利于处理因而确定采用乙醚作为提取溶剂。

Fig.1 The GC-MS fingerprint of rhizoma of Ligusticum chuanxiong Hort.
图1. 川芎气-质联用色谱指纹图谱
A：ethyl ether extract； B：petroleum ether extract； C：n-hexane extracted volatile
A：乙醚提取物； B：石油醚提取物； C：正己烷萃取的挥发油

3.2 川芎乙醚提取物的总离子流色谱图见图2（分段放大图），检出47个峰，鉴定了28种化合物，占总组成的76.42%，各峰的鉴定主要通过NIST98质谱数据系统检索、与标准质谱图比较分析而得。其中主要成分为3-亚丁基苯酞（3.12%），（-）-匙叶桉油烯醇（0.50%）， 3，4-二甲基苯甲酸甲酯（2.15%）， 4-庚基苯酚（15.14%）， 5，7，8- 三甲基二氢香豆精（38.52%）。结果见表1。

Tab.1 Components of Ligusticum chuanxiong Hort.’s Ether Extract
表1. 川芎乙醚提取物的气质联用分析结果

峰号	保留时间	相对峰面积	化合物	分子量	分子式
1	5.76	0.07	?-松油醇 z-beta-Terpineol	154	C10H18O
2	7.25	0.11	4-甲基-1-（1-甲基乙基）-3-环己烯-1-醇4-Methyl-1-(1-methylethyl)-3-cyclohexen-1-o1	154	C10H18O
3	10.17	1.65	2-甲氧基-4-乙烯基苯酚 2-Methoxy-4-vinylphenol	150	C9H10O2
4	12.78	0.29	二氢姜黄素 Dihydrocurcumene	204	C15H24
5	13.30	0.12	丁香油酚 Eugenol	164	C10H12O2
6	14.22	1.07	4(14),11-桉叶二烯 Eudesma-4(14),11-diene	204	C15H24
7	14.42	0.38	十氢-4a-甲基-1-亚甲基-7-(1-甲基亚乙基)-萘 Decahydro-4a-methyl-1-methylene-7-(1-methylethylidene)- naphthalene	204	C15H24
8	16.32	0.50	(-)-匙叶桉油烯醇 (-)-Spathulenol	220	C15H24O
9	17.95	2.15	3,4-二甲基苯甲酸甲酯 3,4-Dimethyl benzoic acid methyl ester	164	C10H12O2
10	18.40	3.12	3-亚丁基苯酞 3-Butylidene-1(3H)-isobenzofuranone	188	C12H12O2
11	18.55	0.22	7-甲氧基苯并呋喃-2-羧酸 7-Methoxybenzofuran-2-carboxylic acid	192	C10H8O4
12	18.84	1.26	1- 乙烯基-2-己烯基环丙烷 1-Ethenyl-2-hexenyl cyclopropane	150	C11H18
13	19.30	0.16	1,2,4-三丙基苯 1,2,4-Tripropyl benzene	204	C15H24
14	19.52	15.14	4-庚基苯酚 4-Heptyl phenol	192	C13H20O
15	19.63	3.13	2-甲基苯酚 2-Methyl phenol	108	C7H8O
16	19.87	38.52	5,7,8- 三甲基二氢香豆精 5,7,8,-Trimethyl dihydrocoumarin	190	C12H14O2
17	20.80	0.16	2-辛基苯酚 2-Octyl phenol	206	C14H22O
18	21.05	1.47	1, 4-双(甲酰基乙基)-苯 1,4-Bis(1-formylethyl)-benzene	190	C12H14O2
19	22.47	0.17	2-(1-羟基环辛基)-呋喃 2-(1-Hydroxycyclooctyl)-furan	194	C12H18O2
20	23.25	0.42	3-(4-Methoxyphenyl)-5-ethyl-(1,2,4)-oxadiazolin	206	C11H14N2O2
21	23.52	0.10	棕榈酸甲酯 Hexadecanoic acid methyl ester	270	C17H34O2
22	24.31	3.15	棕榈酸 n-Hexadecanoic acid	256	C16H32O2
23	24.62	0.62	1,2-二氢-4-苯基萘 1,2-Dihydro-4-phenyl naphthalene	206	C16H14
24	24.84	0.15	棕榈酸乙酯 Hexadecanoic acid ethyl ester	284	C18H36O2
25	24.91	0.11	2’,6’-二甲基-4’-丙氧基苯乙酮 2’,6’-Dimethyl-4’-propoxyacetophenone	206	C13H18O2
26	25.24	1.80	6-Methoxycoumaran-7-o1-3-one	180	C9H8O4
27	26.71	0.31	9,12-十八碳二烯酸甲酯 9,12-Octadecadienoic acid methyl ester	294	C19H34O2
28	26.82	0.07	6-十八碳烯酸甲酯 6-Octadecenoic acid methyl ester	296	C19H36O2

Fig.2 The GC-MS fingerprint of chuanxiong ethyl ether extract
图2. 川芎乙醚提取物指纹图谱
A-1： 5~18 min； A-2： 18~22 min； A-3： 18~27 min

3.3 供试品川芎三种提取方法在14~22 min（RT）之间均有一段峰群，保留时间分别位于17.95，18.40，18.84，19.52，19.63，19.87 min附近，这一峰群保持着相似的峰高比例，在其它溶剂如石油醚、正己烷、乙酸乙酯及甲醇提取物中也有见到。而同属植物药材当归则与之不同。钟伟祥等[2]曾对中成药中当归与川芎的质谱作过鉴别研究。我们也对当归相同条件的乙醚超声提取液在相同色谱环境下获得的总离子流图与川芎作了比较，见图3。当归在18.12 min处比川芎多一个峰，而在18.55，18.84 min则没有出峰，川芎的19.52，19.63 min处的明显峰在当归图谱中也没有显现。可见在本实验确定的色谱条件下，川芎谱图具有明显的特征性，可作为川芎的气相指纹图谱，但仍需经过大批药材的验证。

Fig.3 The GC-MS fingerprint of ethyl ether extract
图3. 川芎与当归的乙醚提取物指纹图谱
A： chuanxiong； B： danggui
A：川芎； B：当归

3.3 由以上分析结果可见，气相色谱分离化合物有着很高的效率，质谱检测器可以提供更多的化合物的信息，提高指纹图谱的可信度，是FID检测器较好的补充。两者联用为药材的分析提供了全面可靠的依据，是指纹图谱研究必要的手段。

参考文献
[1] 袁久荣，容蓉，王玉堂. 川芎饮片挥发油化学成分的研究[J].中国药学杂志，1999，34（6）：406.
[2] 钟伟祥，梁颂培. 中成药中当归、川芎的气相质谱鉴别研究[J].中成药，1997，19（9）：32.

资料来源江苏中康新药指纹图谱开发有限公司网站

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