我公司在遵照中药指纹图谱的技术要求及蜂王浆冻干粉的特殊要求下对该课题进行研究，取得了相当大的进展，现对课题进展情况进行总结。
       一、课题主要任务
       1、选择恰当的供试品溶液制备方法，使其能提取出蜂王浆尽可能多的成分；
       2、恰当的检测方法，能将供试品溶液中的成分尽可能的在色谱图中显示出来，并且达到较好的分离；
       3、色谱指纹图谱的建立和辨认，即对多批样品的试验然后利用中药指纹图谱相似度计算软件进行数据处理得指纹图谱的共有模式；
       4、将生产厂家所进行的饲养试验与指纹图谱试验相结合，经比较得出其他品牌蜂王浆冻干粉之间的差异性。
       二、已完成的研究内容
       1、分析仪器的选择
       经查阅蜂王浆相关资料可知，蜂王浆作为特殊生物制品，主要含有以下成分：化学成分十分复杂，含蛋白质、多种游离氨基酸、脂肪酸、糖、维生素、激素、乙酰胆碱、胰岛素等多种有机成分及多种无机元素、10-羟基-△2-decylenic acid,缩写为10-HDA或HDA，根据这些成分的特性，拟选用高效液相色谱法和气相色谱法作为指纹图谱的检测方法。
       实验表明，采用气相色谱法检测蜂王浆冻干粉，所得色谱峰极少，故确定采用高效液相色谱方法作为蜂王浆指纹图谱的检测方法。
       2、提取方法及溶剂的选择
       （1）超声提取
       采用不同极性的溶剂为提取溶剂，超声提取方法分别提取蜂王浆得供试品，经液相色谱检测，各溶剂提取出的成分均较少，说明这种制备方法不符合要求。
       （2）水浴加热回流
       采用不同极性的溶剂作为提取溶剂，水浴加热回流方法分别提取样品，经液相色谱检测后比较，发现蜂王浆水提取液成分较多，但考虑到温度过高可能会破坏蜂王浆部分成分，故不予采用。
       （3）超声后温浸
       采用不同极性的溶剂作为提取溶剂，先用超声提取约10分钟，然后在50℃水浴锅中温浸2小时的方法分别提取样品，液相色谱检测可知蜂王浆温浸水提液较其他的溶剂提出的成分多，故选择用水作为提出溶剂。
       但该供试品溶液含有亲水性成分和疏水性成分，且极性相差较大，用液相色谱检测不能使各成分达到良好的基线分离，也就是说不能得到好的指纹图谱，故应将该水提取液分成亲水性和疏水性两部分。经比较大孔树脂柱和乙醚萃取，结果是用乙醚萃取法能使蜂王浆温浸水提液基本上分成了两部分，分别用液相色谱检测能使成分达到良好分离，并且该方法简单，重现性好，故作为供试品溶液的制备方法。
       3、液相色谱方法学研究
       用四根不同的色谱柱进行比较试验确定色谱柱；DAD二极管阵列检测器进行多波长扫描，确定最佳检测波长；不同的流动相组分进行不同比例调节的梯度洗脱，确定梯度洗脱条件；最后分别得出蜂王浆亲水性供试品溶液和疏水性供试品溶液的液相色谱检测条件，并进行方法的重现性、稳定性等的研究，表明该方法稳定，重现性好。
       三、正在进行的研究内容
       1、根据上述条件进行多批合格的蜂王浆指纹图谱试验，运用相似度软件进行色谱指纹图谱的建立和辨认；
       2、将原浆进行相应的指纹图谱试验，与成品相比较，找出它们的相关性；
       3、将生产厂家进行的蜂王浆饲养试验与中药指纹图谱试验相结合，采用LC-MS等方法找出蜂王浆特定的活性成分。

蜂王浆亲水性供试品溶液的典型指纹图谱