一、原理：

    利用弱碱性试剂氧化镁使试样中碱性含氮物质游离而被蒸馏出来，用硼酸吸收，再用标准酸滴定，计算出含氮量。

二、仪器与器皿：

1、实验室用样品粉碎机或研钵

2、分析天平：感量0.001g

3、凯氏蒸馏装置：半微量水蒸汽蒸馏式

4、振荡机

5、锥形瓶：150ml、250mL具塞

6、容量瓶：100mL、 1000mL

7、 滴定管：酸式 10mL

三、试剂：

1、 0.lmol／L盐酸标准溶液（无水碳酸钠标定）：吸取分析纯盐酸8.3mL，用蒸馏水定容至1000mL。

2、0.01mol/L盐酸标准溶液：用0.1mol/L盐酸标准溶液稀释获得。

3、2%硼酸溶液：分析纯硼酸2g溶于100mL水配成2%溶液。

4、混合指示剂：甲基红0.1%乙醇溶液，溴甲酚绿0.5%乙醇溶液，两溶液等体积混合，阴凉处保存期三个月以内。

5、1%氧化镁溶液；化学纯氧化镁1.0g溶于100mL蒸馏水振接成混悬液。

四、测定：

1、称取1～5g试样(精确到0.001g)于250mL具塞锥形瓶中，加蒸馏水100mL，振荡摇匀30min后静置，上清液为样液。

2、取20mL2%的硼酸溶液于150mL锥形瓶中，加混合指示剂2滴，使半微量蒸馏装置的冷凝管末端浸入此溶液。

3、蒸馏装置的蒸汽发生器的水中应加甲基红指示剂数滴，硫酸数滴，且保持此溶液为橙红色，否则补加硫酸。

4、准确移取10mL样液注入蒸馏装置的反应室中，用少量蒸馏水冲洗进样入口，塞好入口玻璃塞，再加入10mL%的氧化镁溶液，小心提起玻璃塞使流入反应室，将玻璃塞塞好，且在入口处加水封好，防止漏气，蒸馏10min，使冷凝管末端离开吸收液面，再蒸馏1min，用蒸馏水洗冷凝管末端，洗液均流入吸收液。

5、吸收氨后的吸收液立即用0.01mol/L盐酸标准液滴定，溶液由蓝绿色变为灰红色为终点，同时进行试剂空白测定。

五、测定结果计算：

1、计算见下式：

X1=[(V1-V2)xC1x14 /( M1xV’/V)]x100

式中：X1：样品挥发性盐基氮的含量，mg/100g；

V1：滴定试样时所需盐酸标准溶液体积，mL；

V2：滴定空白时所需盐酸标准溶液体积，mL；

C1：盐酸标准溶液浓度，mol/L；

M1：试样重量，g；

V’：试样分解液蒸馏用体积，mL；

V ：样液总体积，mL；

14：与1.00mL盐酸标准滴定溶液[c(HCl)=1.000mol/L]相当的氮的质量，mg。

2、重复性：

每个试样取两个平行样进行测定，以其算术平均值为结果。允许相对偏差为5%

1、原理：

  挥发性盐基氮是指动物性食品由于酶和细菌的作用，在腐败过程中，使蛋白质分解而产生氨以及胺类等碱性含氮物质。此类物质具有挥发性，在碱性溶液中蒸出后，用标准酸滴定计算含量。

2、试剂：

氧化镁混悬液（10g/ L）：称取决1.0g 氧化镁，加100mL水，振摇成混悬液。

硼酸吸收液 (20g/L)。

盐酸[c(HCL)=0.01mol/L]或硫酸[c(1/2H2SO4)=0.01mol/L]的标准滴定溶液。

甲基红－乙醇指示剂（2g/L）。

次甲基蓝指示剂（1g/L）。

临时用将上述两种指示液等量混合为混合指示液。

3、仪器：

半微量定氮器

微量滴定管：最小分度0.01mL。

4、分析步骤：

样品处理：将样品除去脂肪、骨及腱后，切碎搅匀，称取约10.00g, 于锥形瓶中，加100mL水，不时振摇，浸渍30min  后过滤，滤液置冰箱备用。

蒸馏滴定：将盛有10mL吸收液及5 ~6 滴混合液的锥形瓶置于冷凝管下端，并使其下端插入吸收液的液面下，准确吸取5.0m L上述样品滤液于蒸馏器反应室内，加5mL氧化镁悬液(10g/L)，迅速盖塞，并加水以防漏气，通入蒸汽，进行蒸馏，蒸馏5min，即停止，吸收液用盐酸标准滴定溶液（0.01mol/L）或硫酸标准滴定，终点至蓝紫色，同时做试剂空白试验。

5、计算：

X1= [ (V1－V2)XC1X14 / (m1X5/100)] X100

式中：X1：样品中挥发性盐基氮的含量，mg/100g；

v1：测定用样液消耗盐酸或硫酸标准溶液体积，ml；

v2：试剂空白消耗盐酸或硫酸标准液体积，ml；

c1：盐酸或硫酸标准溶液的实际浓度，mo/Ll；

14：与1.00mL盐酸标准滴定溶液[c(HCl)=1.000mol/L]或硫酸标准滴定溶液[c(1/H2SO4)=1.000mol/L] 相当的氮的质量，mg ；

m1：样品质量，g；

结果的表述：报告算术平均值的三位有效数；

允许差：相对偏差<=10%

1、原理：

挥发性含氮物质可在37℃碱性溶液中释放出，挥发后吸收于吸收液中，用标准酸滴定，计算含量。

2、试剂：

饱和碳酸钾溶液：称取50g碳酸钾，加50mL水，微加热助溶，使用上清液。

水溶性胶：称取10g阿拉伯胶，加10ml水，再加5ml 甘油及5g 无水碳酸钾(或无水碳酸钠)，研匀。

硼酸吸收液 (20g/L)。

盐酸[c(HCL)=0.01mol/L]或硫酸[c(1/2H2SO4)=0.01mol/L]的标准滴定溶液。

甲基红－乙醇指示剂（2g/L）。

次甲基蓝指示剂（1g/L）。

3、仪器：

扩散皿（标准型）：玻璃质，内外室总直径61mm，内室直径35mm，外室深度10mm，内室深度5mm，外室壁厚3mm，内室壁厚度2.5mm，加磨砂厚玻璃盖。

微量滴定管：最小分度0.01mL

4、分析步骤：

将水溶性胶涂于扩散皿的边缘，在皿中央内室加入1mL吸收液及1滴混合指示液。在皿外室一侧加入1.00mL按方法(一)制备的样液，另一侧加入1mL饱和碳酸钾溶液，注意勿使两液接触，立即盖好；密封后将皿于桌面上轻轻转动，使样液与碱液混合，然后于37℃温箱内放置2h，揭去盖，用盐酸或硫酸标准滴定液(0.100mol/L)滴定，终点至蓝紫色，同时做试剂空白试验。

5、计算：

X1=[(V1-V2)xc1x14 /( m1x1/100)]x100

式中：X1：样品中挥发性盐基氮的含量，mg/100g；

v1：测定用样液消耗盐酸或硫酸标准溶液体积，ml；

v2：试剂空白消耗盐酸或硫酸标准液体积，ml；

c1：盐酸或硫酸标准溶液的实际浓度，mo/Ll；

14：与1.00mL盐酸标准滴定溶液[c(HCl)=1.000mol/L]或硫酸标准滴定溶液[c(1/H2SO4)=1.000mol/L] 相当的氮的质量，mg ；

m1：样品质量，g；

6、允许差：

相对偏差<=10%