1 应用范围

本法适用于化妆品中焦油色素的测定。

2 试剂

2.1 石油醚：馏程30～60℃。

2.2 石油醚：馏程60～120℃。

2.3 碱性氯化钠溶液： 10％氨水+5％氯化钠溶液（l+9）。

2.4 硫酸+乙酸混合溶液：硫酸+乙酸+水（4+9+1）。

2.5 酸性乙醇：4％盐酸+无水乙醇（1+1）。

2.6 吸附剂

2.6.1柱层层析用的硅胶：100目。

2.6.2薄层层析用的硅胶。

2.7 色谱法用的滤纸

2.7.1滤纸。

2.7.2液体石蜡处理滤纸：取液体石蜡5g溶于100ml石油醚中，将滤纸浸润30min，取出风干后备用。

2.8 薄层板

用硅胶制成250～300?m厚薄层板，于100℃下加热60min活化。

2.9 滤纸层析用展开溶剂

2.9.1丙酮+乙醇+乙酸+水（70+10+5+15）。

2.9.2乙二醇甲醚+水（10+30）。

2.9.3乙二醇+水+氨水（10+30+1）。

2.9.4甲醇+氨水+水（63+40+77）。

2.9.5正丁醇+乙醇+0.5mo1／L氨水（6+2+3）。

2.9.6 25％乙醇+5％氨水（1+l）。

2.9.7用戊醇饱和的氨水。

2.9.8丙酮+水（7＋3）。

2.9.9甲醇+水（1+1）。

2.9. 10氨水+水（1+1）。

2.9.11乙酸+水（1+1）。

2.9.12正丁醇+乙醇+0.5mol／L乙酸（6+2+3）。

2.9.13甲醇+乙酸+水（50+5+45）。

2.9.14甲醇+丙酮+水（25+25+50）。

2.10 薄层层析用展开溶剂

2.10.1 苯。

2.10.2 1，1-二氯乙烷。

2.10.3 1，1，2-三氯乙烷。

2.11 色素标准溶液^（1）

2.11.1 称取油红OS 0.1g,加入100ml乙醇,加温溶解,冷后过滤。

2.11.2 称取红色213号（若丹明B）、红色215号（若丹明B硬脂酸盐）各0.1g,分别溶于100ml 1%盐酸溶液中。

2.11.3 称取红色230号（1）和（2）（伊红YS和YSK）、红色218号（四氯四溴荧光素）、红色223号（四溴荧光素）和橙色201号（二溴荧光素）各0.1g，分别溶于100ml 1%氢氧化溶液中。

2.11.4 称取阿尔巴红0.02g溶于100ml 1%氢氧化钠溶液中。

2.11.5 称取红色221号（甲苯胺红）、红色226号（赫林顿桃红CN）、红色228号（永久红）、橙色203号（永久橙）、橙色204号（联苯胺橙G）、黄色205号（联苯胺黄）、红色404号（艳坚牢猩红）、橙色401号（汉撒橙）、黄号401号（汉撒黄）、深红、吡唑啉-5-酮红、阴丹士林棕R各0.1g,分别溶于100ml甲苯中过滤。

2.11.6 称取红色202号(立索尔玉红BCA)、红色203号（色淀红C）、红色204号（色淀红CBA）、红色205号（立索尔红）、红色206号（立索尔红CA），红色207号（立索尔红BA），红色208号（立索尔红SR）、红色219号（艳色淀红R）、红色220号（深紫酱），红色405号（永久红F5R），色淀红D各0.1g，分别加入100ml酸性乙醇，加热，冷后过滤。

3 分析步骤

3.1 样品预处理^(2)(10)(见图2-3-38)

3.1.1 待测溶液A(石油醚提取液):取样品5～10g于离心管中^（3），在水浴上加热使水几乎蒸干，冷却后加石油醚20ml，用玻璃棒充分搅拌使色素溶出，离心分离5min（3500～4000r/min，以下相同）。若样品为唇膏时，取样品50～100mg于离心管中，加20ml石油醚，用玻璃棒充分压碎样品，搅拌使色素溶出，离心分离5min。小心将上清液过滤^（4），再将离心管内的残留物中加入10ml石油醚，与前述同样处理，反复操作直至石油醚不再着色为止^（5），合并全部石油醚提取液作待测溶液A。石油醚不溶部分保留转入（3.2.）的操作。

将待测溶液A进行3.1.1.1和3.1.1.2项处理,制备成吸收光谱用和层析用待测溶液。

3.1.1.1 取一部分待测溶液A于分液漏斗中,每次用少量水洗涤数次后,蒸干。残留物溶于氯仿中，稀释至适当浓度，有于吸收光谱测定。

3.1.1.2 待测溶液A的剩余部分加入约1/4容量的硫酸+乙酸混液（2.4）摇匀,放置待分层后,立即将酸液转移至200ml的烧瓶中。此溶液用待体积的水稀释后，用25%氢氧化钠溶液调至碱性，以约1/3体积的乙醚提取色素，乙醚液每次用约相同体积的水洗涤3次，加入少量无水硫酸钠脱水，低温蒸干，残留物溶于少量的乙醇，作为层析用。

3.1.2 待测溶液B(2%氢氧化钠提取液)

将前项3.1.1操作中保留的不溶于石油醚残留物加温，除去石油醚后，加20m1 2％氢氧化钠溶液，充分搅拌，振摇提取，离心分离。如2％氢氧化钠溶液有可溶性色素存在时，小心地过滤，离心管内残留物中再加入10m l2％氢氧化钠溶液，按上述同样处理，如此反复4～5次之后⁽⁶⁾，合并氢氧化钠提取液，残留物转入3.1.3的操作。

将2％氢氧化钠提取液移入分液漏斗中，每次用约1/3体积的乙醚提取色素数次。取每次乙醚提取液的一部份（约1ml）于试管中，加入同体积的1％盐酸摇匀，直至盐酸溶液不显红色为止。

乙醚溶液和氢氧化钠溶液分别按下述操作处理。

乙醚溶液：每次将乙醚溶液用少量0.5％氢氧化钠溶液洗涤1～2次，弃去洗液。再用乙醚溶液1／10体积的1％盐酸混合振摇提取色素。取提取液的一部分，调整至适当液性，作吸收光谱和层析用待测溶液B一1。

氢氧化钠溶液：调氢氧化钠溶液的pH至乙酸酸性，每次用1／2体积的乙醚提取数次后，合并乙醚溶液。此时，如下层的乙酸液仍着色时，则予保存（a液）。

过滤乙醚溶液，每次用约1／3体积的1％氢氧化钠溶液提取色素数次。合并全部1％氢氧化钠溶液，用乙酸调至酸性，加入约1／2体积的戊醇，振摇后静止，待分二层后取戊醇层，加入约1／2体积的石油醚，每次用同体积的碱性氯化钠溶液，振摇提取色素数次。此时，上层的戊醇-石油醚混合溶液仍呈色时，另予保存（6液）。⁽⁷⁾

合并所有碱性氯化钠溶液，过滤后，调至乙酸酸性，每次再用同体积的乙醚提取色素2～3次。合并全部乙醚溶液，每次加入少量1％氢氧化钠溶液，振荡提取2～3次，合并全部1％氢氧化钠溶液。

取此溶液一部分，调整至适当的酸性，作吸收光谱用待测溶液B一2。

其余部分作层析用待测溶液B一2。

过滤保留的a液（乙酸酸性溶液），加入1／2体积的戊醇、振荡、使色素转入戊醇层，分取戊醇溶液，加入约2倍体积的石油醚，再加少量水，混合、振荡，提取色素。此提取液按下述的待测溶液D项（3.2.4）进行试验。

前述的b液（戊醇-石油醚溶液）加入2倍量的石油醚，每次加入少量的1％氢氧化钠、溶液混合振荡，反复此操作2～3次提取色素，合并全部1％氢氧化钠溶液，调至乙酸酸性，每次用1／2体积的乙醚提取色素2～3次，合并乙醚提取溶液，在水浴上除去乙醚。

残留物按待测溶液D项进行试验，如残留物中存在阿尔巴红，将残留物溶于1％氢氧化钠溶液中，过滤，滤液作吸收光谱和层析用待测溶液B一3。

3.1.3待测溶液C（甲苯提取液）

取3.1.2项离心管内的残留物加20ml水，用玻璃棒充分搅匀后，离心分离弃去上清液⁽⁸⁾。离心管内的残留物加热干燥，加20ml甲苯，用玻璃棒充分搅匀，待色素溶出后，离心分离。小心地过滤上清液，向离心管内的残留物中加甲苯10ml，如前同样操作，反复提取至甲苯提取液几乎无色为止，合并全部甲苯提取液作待测溶液C。

离心管内的残留物转入3.1.4项操作，如果仍有色素混时。按下述操作。

柱层析法⁽⁹⁾：将硅胶浊悬在石油醚中，充分搅拌除去空气，经漏斗流入保持垂直的玻璃管（内径1cm，长30cm，一端有狭窄部，狭细部的上部用石油醚浸润并已除去气泡的脱脂棉堵塞）硅胶充填15cm的高度，在它的上面放一片比玻璃管内径略小的圆形滤纸。待残留于层析柱上部过量的石油醚全部渗入柱内后(注意,任何时候液面不得低于柱面),把甲苯提取液(适当量)徐徐自上方注入,使之渗透柱内,然后用甲苯展开,以1ml/min的流速溶出分离的吸收色带。

3.1.4 待测溶液D(酸性乙醇提取液)

向3.1.3项离心管内的残留物中,加入酸性乙醇5～10ml,搅匀,加热,冷却后离心分离.小心过滤上清液,再向离心管内的残留物加酸性乙醇5～10ml,同样处理后,合并全部酸性乙醇提取液,作待测溶液D.

离心管内的残留物转入3.1.5的操作。

3.1.6 待测溶液F(1-氯萘提取液)

向3.1.5项离心管内的残留物加乙醇10ml,搅匀后离心分离,弃去上清液。此操作反复2次后，加热干燥，加1-氯萘5～10ml，用玻璃棒充分搅匀，加热溶出色素，冷却后离心分离。然后小心过滤上清液，再向离心管内的残留物加1-氯萘5～10ml，同样操作，直至1-氯萘几乎不着色为止，合并全部1-氯萘提取液，作待测溶液F。

3.2 测定

3.2.1 待测溶液A

3.2.1.1 吸收光谱:测定待测溶液A的可见光吸收光谱,与油红OS⁽¹¹⁾的吸收光谱比较判定。

3.2.1.2 滤纸层析⁽¹²⁾:将层析用待测溶液A和色素标准溶液2.11.1分别点在同一层析滤纸上(2.7.2),各点间隔1cm,原点距滤纸边4cm,用上升法展开,展开溶液为2.9.1或2.9.8,展开距离为20～25cm,

3.2.1.3 薄层层析⁽¹³⁾:将层析用待测溶液A和色素标准溶液2.11.1,分别点在同一薄层板上不同位置,用薄层展开溶剂2.10.1或2.10.3展开距离为10～13cm。

3.2.2 待测溶液B

3.2.2.1 吸收光谱:调节待测溶液B-1与以下标准色素溶液同一液性,测定可见光吸收光谱,与红色213号(若丹明B)⁽¹⁴⁾、红色215号（若丹明B硬脂酸盐）^（15）的吸收光谱比较判定。测定待测溶液B-2的吸收光谱，与红色230号的（1）和（2）（伊红YS和YSK）^（16）、红色218号（四氯四溴荧光素）^（17）、红色223号（四溴荧光素、曙红）^（18）或橙色201号（二溴荧光素）^（19）的吸收光谱比较判定。

另外，将用于测定吸收光谱的待测溶液B-3调整至与色素标准溶液同一液性，测定吸收光谱，与阿尔巴红^（20）的吸收光谱比较判定。

3.2.2.2 滤纸层析:在滤纸2.7.1上分别点层析用待测溶液B-1和色素标准溶液2.11.2,用展开溶剂2.9.2～2.9.4展开。展开距离为20～25cm。同样，测定待测溶液B-2，用色素标准溶液2.11.3,用色素标准溶液2.11.3为对照,采用展开溶剂2.9.5～2.9.7；待测溶液B-3,用色素标准溶液2.11.4为对照,用展开溶液剂2.9.5或2.9.7～2.9.14,展开后比较判定。

3.2.3 待测溶液C

3.2.3.1 吸收光谱:将待测溶液C调至适当浓度,测定可见光吸收光谱,与红色221号(甲苯胺红)⁽²¹⁾、红色226号（赫林顿桃红CN）^（22）、红色228号（永久红）^（23）、橙色203号（永久橙）^（24）、橙色204号（联苯胺橙G）^（25）、黄色205号（联苯胺黄）^（26）、红色404号（艳牢猩红）^（27）、橙色401号（汉撒橙）^（28）、深红^（30）、派拉佐隆红^（31）、阴丹士林棕R^（32）的吸收光谱比较判定。

如果上述色素混合存在时，需经3.1.3待测溶液C中的柱层析分离,分别测定各溶出液可见光吸收光谱。

3.2.3.2 薄层层析⁽³³⁾:将待测溶液C配制权威性适当浓度和色素标准溶液2.11.5分别点样在硅胶薄层板上,用薄层层析用展开溶剂2.10.2或2.10.3展开至10～13cm,然后比较判定。

3.2.4 待测定溶液D

3.2.4.1 吸收光谱:取一部分待测溶液D调整至与标准色素溶液相同液性后,测定可见光吸收光谱,与红色202号(立索尔玉红BCA)⁽³⁴⁾、红色203号（色淀红C）^（35）、红色204号（色淀红CBA）^（36）、红色205号（立索尔玉）^（37）、红色206号（立索尔红CA）^（38）、红色207号（立索尔红BA）^（39）、红色208号（立索尔红SR）^（40）、红色219号（艳色淀红）^（41）、红220号（深紫酱色）^（42）、红色405号（永久红F5R）^（43）、和色淀红D^（44）的吸收光谱比较判定。

3.2.4.2 滤纸层析:待测标准溶液D和色素标准溶液2.11.6分别点于滤纸上,用展开溶剂2.9.2、2.9.3、2.9.10或2.9.11展开后比较判定。

3.2.5 待测溶液E

3.2.5.1 吸收光谱法:调整待测溶液E至适当浓度,测定可见光吸收光谱,与兰色201号(靛蓝)⁽⁴⁵⁾的吸收光谱比较判定。

3.2.6 待测溶液F

3.2.6.1 吸收光谱:取待测溶液F的一部分,调整适当浓度,测定可见光吸收光谱,与蓝色204号(卡尔庞士林蓝)⁽⁴⁶⁾、蓝色404号（酞菁蓝）^（47）、的吸收光谱比较判定。

如果是两种色素混合在一超时需用纤维素粉层折柱以?-氯萘作展开溶液，与待测溶液C（甲苯提取液）同样进行层样分离色素，测定它们的吸收光谱，与蓝色204号（卡尔庞士林蓝的吸收光谱比较判定。^（48）

注解：

（1）本文着色剂代号的名称，C.I(Colour Index)号、化妆品卫生标准（GB7916-87）中表6的序号及类别见表2-3-28。

（2）样品中色素的分离萃取步骤可用图2-3-38表示。

（3）使用容量为50ml的具塞离心管。

表2-3-28 着色剂的本文代号、名称、C.I号、序号及类别

* * 见“着色剂（色素）”正文中合成染料的结构分类。

（4）不要让管底的沉淀上浮，小心用小张滤纸过滤。

（5）样品用石油醚处理可提取样品中可溶性色素（油溶性色素）、油脂及其它石油醚可溶性物质，使以后提取色素操作容易，同时也可除去油脂的干扰。不存在石油醚可溶性色素时，此层不显色，但为了脱脂的目的，必需用石油醚反复提取2～3次。

如存在红色2l5号（若丹明B硬脂酸酯），其一部分进入石油醚中，这时如把石油醚提取液用1％盐酸溶液提取，红色215号进入l％盐酸而被除去，红色221号（甲苯胺红）在石油醚中略呈黄褐色，此时石油醚提取2～3次后停止，立即转入下面2％氢氧化钠溶液的操作。

（6）进入2％氢氧化钠溶液中的主要是红色223号（四溴荧光素）和红色213号（若丹明B），除此之外，也有少量的红色202号（立索尔玉红BCA），红色203号（色淀红0，红色219号（艳色淀红m被提出。其中红色223号和红色213号，经三次提取，几乎被完全提出了，而红色202号、红色203号、红色219号，由于溶出慢，每次提取液稍有着色。红色202号和红色203号呈褐色，经色219号呈红褐色。第4、5次提取液有此状态时，停止用2％氢氧化钠溶液的提取，转入下面甲苯提取方法。

（7）进入D液（酸性乙醇溶液）的一部分色素被提取至戊醇-石油醚溶液中。

（8）反复水洗2～3次以除去氢氧化钠。如氢氧化钠略有残留，干燥时色素会分解。

（9）此方法依照文献： Weiss L C J.A.O.A.C,34：453，l951。

（10）本法是焦油色素测定时样品预处理的基本操作。样品中含焦油色素品种较少时，也可以采用比较简单的分离方法，如图2-3-39和图2-3-40表示的处理步骤。

图2-3-38表示的操作与本法基本一致，取样品于离心管中，加溶剂搅拌，振摇，顺次提取分离，各步提取液通过薄层层析与标准色素比较判定。用石油醚提取主要是脱脂。A层可提取氧杂蒽系色素；B层提取油溶性色素；C层可以提取出颜料和色淀化的水溶性色素。

如果样品中色素在三种以下时，可以采用图2-3-40的简易操作步骤进行分离提取。但是，由于残留物的吸附，对红色3号（红霉素）、红色226号（还原桃红色CN）等提取有困难时,可以作吡啶提取最终残留物,用与图2-3-40A层同样展开溶剂分离鉴定。对红色203号（色淀红C）和红色208号（立索尔红SR）的分离鉴定，展开剂采用1，4-二氧杂环已烷+吡啶（1+1）效果较好。

（l1）油红OS（oil Red OS） C.I.26125

红色粉末，不溶于水，稍溶于石油醚、乙醇和丙酮中，呈红色。溶于氯仿中呈暗红色。

溶于硫酸溶液，呈绿蓝色，用水稀释生成蓝紫色沉淀。氯仿溶液的最大吸收波长532±2nm。此色素往往由于有不纯物呈红褐色，有强烈的臭气。

精制：取色素约20g，加15ml氯仿，在水浴上加热溶解，加乙醇1000m1，加热90min后冷却，离心分离。弃去上清液、残留物加乙醇搅匀再次离心分离。残留物中加水，提取过滤，135℃下干燥，m.p.为223℃。

（12） 可分离油红OS，红色501号（药用猩红）和红色225号（苏丹Ⅲ）。

（13） 硅胶用Silica gel D₅（Camag）,Silica gel 60（Merck）或和光胶B5（和光纯药）等。按各自规定的处方制薄层。用Silica gel D5时油红OS的R

表 2-3-29 Rf 值

（14）红色213号（若丹明B）（Rhodamine B），C.I. 45170。

褐色粉末，有绿色的金属光泽，在水中溶解呈有蓝色感的红色，发出强荧光。荧光热时消失，冷时再现。溶于硫酸溶液呈黄褐色，用水稀释经红色至有蓝色感的红色。水溶液中性或碱性（pH6.0～13.1）时最大吸收波长553±2nm，强酸性（pH1.4）时最大吸收波长；561±2nm，对存在于此色素中的间二乙胺苯酚的定量法参照文献①。此色素用稀盐酸再结晶，80℃干燥，185℃软化，193～195℃熔融。用氢氧化钠变成碱性，由乙醚或甲醇水三次再结晶， 135℃干燥的m.p.是165℃。

此色素往往含有三乙基若丹明，可用柱层析法分离。向预先用硅烷处理的硅藻土加入正癸醇（含1％氨溶液）混合后装入柱中，注入色素液，用1％氨溶液淋洗。三乙基若丹明B比若丹明先流出。

（15） 红色215号（若丹明B硬脂酸盐） （Rhodamine B stearate）。C.I. 45170

淡红色粉末，溶于乙醇呈红色，发强荧光，溶于乙醚、苯和动物油脂，几乎不溶于水。在冷的2％氢氧化钠溶液中呈有蓝色感的红色，有荧光。溶于硫酸溶液呈黄褐色，用水稀释后由红色混浊变成有蓝色感的红色。

（16）红色230号（1）和（2）（伊红YS和YSK） （Eosine YS和YSK），C.I.45380。

红色粉末，结晶有蓝红色的光泽。溶于水，在水中呈橙红色，发出绿色的荧光，微溶于乙醇。，在水溶液中加无机酸，产生四溴荧光素沉淀。

与氢氧化钾溶液（20～40％）共同加热时呈红紫至蓝色，在硫酸溶液中呈橙黄色，用水稀释生成橙黄色沉淀。

0.02N乙酸铵溶液的最大吸收波长是517±2nm。

本品的副色素之一荧光素钠可用纤维素（索尔卡普洛克SW一40）层析柱分离后，用分光光度法定量。

（17）红色218号（四氯四溴荧光素， Tetra-chloroterabromofluorescein，C.I.454l0。

有蓝色感的淡红色粉末，不溶于稀酸，几乎不溶于水。溶于稀碱和己醇中，碱性溶液呈红色，有荧光。溶于硫酸溶液呈黄褐色。水溶液pH5.1～13时，最大吸收波长538±2nm。二乙酞基体的m.p.为308℃。

（18） 红色223号（四溴荧光素，Tetrabromofluorescein，C.1.45380。

淡红色粉末，溶于乙醇、乙酸乙酯和稀碱。不溶于甘油、甲苯、油脂和稀酸，难溶于水。碱性溶液呈红色，有绿黄色荧光，硫酸溶液呈黄色。水溶液在pH5.3～13.0时最大吸收波长为517±2nm。在487nm处有弱肩。

二乙酞衍生物的m.p.是292～295℃。

本色素通常含有三溴荧光素副色素，此副色素的定量滤纸层析法好于柱层析法，现在也可以使用纤维薄层板。

此色素也称溴酸（Bromo acid）。溴酸是二溴荧光素或四溴荧光素衍生物的别名。

（19）橙色201号（二溴荧光素，Dibromofluorescein），C.I.45370。

橙色粉末，不溶于稀酸，几乎不溶于水。溶于稀碱或乙醇，呈橙色，有绿黄色荧光。在硫酸溶液中呈黄色，水溶液pH7～13时，最大吸收波长504±2nm。其二乙酞衍生物的m.p.210～211℃。

① Harrous,LS:J Assc offic Agr Chemist,34,133(1951)。

此色素往往含有荧光素，4-溴荧光素、2,4和2，5-二溴荧素、2，4，5-三溴荧光素2，4，5，7-四溴荧光素副色素。这些色素水溶液（0.5％氨溶液）的最大吸收波长如下：

这些色素的分离鉴定也可用1％氯化钠溶液（W／V）加氨水lml或用正丁醇+乙醇（3+7）混合溶液进行滤纸层析分析（滤纸Whatman No.1）。而且现在也可以使用纤维薄层板代替滤纸层析。

此色素别名是溴酸。

（20）阿尔巴红（Alba Red），C.I.13058。

暗紫红色粉末，溶于丙酮、乙醇呈红色，不溶于石油醚。在水中分散成红色。在盐酸、硝酸溶液中呈红色，在氢氧化钠溶液（10％）中呈黄色。溶于硫酸呈绿褐色，用水稀释成鲜红色溶液。2％氢氧化钠溶液的最大吸收波长是434±2nm，m.p.153℃。

（21）红色221号（甲苯胺红， Toluidine red，C.I.12120。

橙色粉末，不溶于水、稀酸、稀碱和冷乙醇等。溶于苯、甲苯和二恶烷中呈橙色。溶于硫醇溶液呈红紫色，用水稀释生成橙色沉淀。

氯仿溶液的最大吸收波长为511±2nm。甲苯溶液的最大吸收波长为509±2nm。此色素由氯仿再结晶的m.p. 276.5℃。Schulz（1931）报告m.p.278℃（冰乙酸）。

此色素往往含有1-p-甲苯并-2-苯酚副色素，可利用在氯仿中溶解度的差异分离此副色素，再由分光光度法定量（测定波长486nm）。

（22）红色226号（赫林顿桃红CN，Helindone Pink CN），C.I.73360。

桃红色粉末，稍溶于水、乙醇和丙酮中。溶于二甲苯呈桃红色，略有黄色的荧光。加硫酸变成红色，然后变绿色。用水稀释生成红色沉淀。在浓氢氧化钠溶液中无变化。不溶于油脂和石蜡。甲苯溶液的最大吸收波长， 535±2nm。

（23）红色228号（巴马通红， Permanent Red），C.I.12085。

朱红色粉末，不溶于水、稀酸、稀碱，微溶于乙醇、苯、乙醚、甲苯，溶于乙酸。干燥的色素在碱性溶液中不变化。溶于硫酸呈紫色，用水稀释生成黄红色的沉淀，在硝酸溶液中呈鲜朱红色，在氢氧化钾乙醇溶液中呈紫色。市售品溶于苯和甲苯中，呈橙色。溶于硝酸呈淡红色，有荧光。甲苯溶液的最大吸收波长是486min。

（24）橙色203号（永久橙， Permanent Orange），C.I. 12075。

橙色粉末，不溶于水。溶于甲苯、氯仿（约0.02％，25℃）中呈橙色，在氢氧化钠-乙醇溶液中呈深蓝色。在硫酸溶液中呈蓝紫色，用水稀释生成橙色沉淀。氯仿溶液和甲苯溶液的最大吸收波长为480±2nm。由乙酸结晶的m.p.302℃。对混在此色素中的2，4-二硝基苯胺的确良定量法参照文献^①。

（25）橙色204号（联苯胺橙G，Benzidine Orange G），C.I.21110。

橙红色粉末,不溶于水,硫酸溶液中呈暗红橙色,用水稀释生成带红橙色沉淀。浓硝酸溶液中呈暗橙色。

（26）黄色205号（联苯胺黄，Benzidine Yellow G），C.I.21090。

黄色粉末，不溶于水，硫酸溶液中呈黄橙色，用水稀释生成褐黄色沉淀。甲苯溶液的最大吸收波长428±2nm。

（27）红色404号9艳牢猩红，Brilliant Fast Scarlet），C.I.12315。

红色粉末，不溶于不，溶于氯仿呈红色。m.p.304℃(乙酸再结晶)。

(28)橙色401号(汉撒黄,Hansa Orange),C.I.11725。

橙色粉末,不溶于水,溶于氯仿、苯和甲苯，呈橙色。硫酸溶液中呈橙色，用水稀释生成橙色沉淀。

（29）黄色401号（汉撒黄，Hansa Yellow）,C.I.11680。

橙黄～黄色粉末,不溶于水。溶于氯仿、苯及甲苯，呈黄色，用水稀释生成黄色沉淀。m.p.256℃(乙酸再结晶)。

（30）深红（Deep Red），C.I.12350。

红褐色粉末，不溶于水、稀酸、稀碱、溶于苯、甲苯及氯仿，呈黄色～红色。M.p.317℃硝基苯再结晶)。

（31）派拉佐隆红（Pyrazolone Red）C.I.21120。

红色粉末，不溶于水。

（32）阴丹士林棕R（Indanthrene Brown R）。C.I.69015

红褐色粉末,不溶于水、石油醚、甘油。在硫酸溶液中呈暗枣红～红色，用水稀释生成红褐色沉淀。难溶于氯仿、二甲苯、甲苯（黄褐色）。

（33）以薄层层析展开分离,用适当的溶剂提取色素后,也可测定吸收光谱,表2-3-30所示为甲苯提取的色素在不同展开剂中的R_f值

表 2-3-30 R_f值

(34)红色202号(立索尔玉红BCA,Lithol Rudine BCA),C.I.15850。

红色粉末，不溶于冷水、乙醇、甘油及醇类。溶于含有稀盐酸50%乙醇和含有乙撑二胺四乙酸50％乙醇溶液中，呈红色。在硫酸溶液中呈紫红色，用水稀释生成紫红色沉淀。微溶于冷20％氢氧化钠溶液，呈褐色。

含稀乙醇的0.1mol／L盐酸和0.1mol／L氢氧化钠溶液的最大吸收波长分别为520nm和492nm。此色素吸收光谱在pH1～3时无变化。

此色素往往含有如下的副色素。

①4-p-甲苯并-3-羟基-2-萘酸：此副色素是用于制造立索尔玉红混在对甲苯胺-间磺酸的未磺化体中。立索尔红在酸性条件下不进入乙醚层，但此副色素却进入乙醚，然后用氢氧化钠处理乙醚，提取出此色素可以定量。

此副色素还可用如下方法定量。色素在甲基纤维素和盐酸中溶解后，甩异丙醚振荡萃取，此色素转入异丙醚层，取此提取液定量，在507nm处测定。

②1-p-甲苯并-2-萘酚：此副色素在前述处理时残留在乙醚层中，可与立索尔玉红分离定量。

对此色素中的副色素的定量，参照A.0.A.C.8th Ed. 7l4（1955）。

（35）红色203号（色淀C,Lake Red C）,C.I. 15585。

橙包粉末，微溶于冷水、冷2％氢氧化钠溶液、乙醇。水溶液加盐酸或氢氧化钠生成红色沉淀。溶于盐酸酸化的稀乙醇，呈橙色。在硫酸溶液中呈红紫色，用水稀释生成褐红色沉淀。

此色素的稀乙醇溶液，最大吸收波长于pH1.0～8.5时为488±2nm， pH12.6为485nm， pH14为495nm。

此色素是由2-氯-5-甲苯胳-4-磺酸（色淀红C胺）和?-萘酚耦联生成的，在制造此色素时，在原料?-萘酚中混有?-萘酚，?-萘酚和色淀红C胺耦联，生成易溶于碱的色素［4-(4-氯-2-磺基-5-甲苯并）-1-萘酚］。可利用红色203号和此副色素对碱溶解度的差异分离定量，对存在于此色素中色淀红C胺的定量参照文献A.O.A.C,8th Ed. 735， 1955。

（36）红色204号（色淀红CBA， Lake Red CBA） C.I，15585。

橙红色粉末，不溶于冷水，微溶于冷2％氢氧化钠溶液，呈褐色。溶于盐酸酸性稀乙醇和含有乙撑二胺四乙酸的50％乙酸溶液中，呈橙色。硫酸溶液中呈红紫色。

（37）红色205号（立索尔红， Lithol Red），C.I.15630。

橙红色的粉本末，不溶于冷水和冷乙醇，加温微溶，呈黄红色。几乎不溶于冷2％氢氧化钠溶液，溶于盐酸酸性乙醇溶液，呈橙红色，难溶于丙酮。硫酸溶液呈紫红色，用水稀释生成红紫→红褐色沉淀。

稀乙醇溶液pHl.4～8.3的最大吸收波长为494±2nm。pH14时的最大吸收波长483±2nm。

此色素往往含有如下的副色素。

①1-(2-叠氮素）-2-萘酚：此副色素是在?-萘胺磺酸中混杂的?-萘胺和?-萘酚耦联生成的脂溶性色素，不形成金属盐。因此，用有机溶剂（如苯）提取此色素时，可与立索尔红分离定量。

②2-（2-羟基-1-叠氮萘）-6-萘磺酸：（2，6体）

③2-（2-羟基-1-叠氮萘）-6-茶磺酸：（2，8体）

这些副色素是由混在吐氏酸中的?-萘酸-6-磺酸、?-萘胺-8-磺酸和?-萘酚耦联生成，这些色素的分离定量方法是，在乙酸和8mo1／L盐酸中加热后，将此溶液和乙醚振荡混合，红色205号（立索尔玉红）进入乙醚层中，酸层用异戊醇振荡提取，分离2，6体和2，8体，在495nm处测定。

④2-（4-羟基-1-叠氮萘）-1-萘磺酸：此副色素由混在?-萘酚中的?-萘酚和吐氏酸耦联生成，此副色素难溶于酸，易溶于碱，利用此性质可分离定量。

（38）红色206号（立索尔红CA，Lithol Red CA）。C.I. 15630。

红色粉末，不溶于冷水和冷乙醇，但加温可微溶，呈橙色。几乎不溶于冷2％氢氧化钠溶液。溶于盐酸酸性稀乙醚和含有乙撑二胺四乙酸的50％乙醇溶液，呈橙红色，溶于硫酸呈红紫色。

（39）红色207号（立素尔红BA， Lithol Red BA），C.I. 15630。

红色粉末，与红色206号基本相同。

（40）红色208号（立索尔红SR,Lithol Red SR），C.I. 15630。

红色粉末，和红色206号基本相同

（41）红色219号（艳色淀红R，Brilliant Lake Red R），C.I. 15800。

红色粉末，不溶于冷水，但微溶于冷的2％氢氧化钠溶液，呈红褐色。溶于盐酸酸性稀乙醇溶液，呈橙红色，溶于碱性稀乙醇中呈暗红色，溶于含有乙撑二胺四乙酸的50％乙醇中。溶于硫酸呈红色，用水稀释生成红色沉淀。

稀乙醇溶液在pH6.9时最大吸收波长487nm，在pH13时是483nm。

由乙酸再结晶的本色素m.p.是233℃。

此色素由?-羟基苯甲酸和苯胺合成，苯甲酸中混有?-萘酚时，它和苯胺耦联生成脂溶性色素（偶氮苯-B-萘酚）。此脂溶性色素用苯提取时，可与红色219号分离。

（42）红色220号（深紫酱色， Deep Maroom），C.I. 15880。

红褐色粉末，不溶于冷水，难溶于冷2％氢氧化钠溶液。溶于冰乙酸中呈红色，碱性丙酮中呈红色，碱性乙醇中呈红褐色，盐酸酸性乙醇中呈红色，硫酸溶液中呈红紫色。也溶于含有乙撑二胺四乙酸的50％乙醇溶液中。

稀乙醇溶液pH在1.0～3.5时，最大吸收波长为528±2nm， pH在5.8、8.4、13时，最大吸收波长分别为518、516、498nm。

（43）红色405号（永久红F5R， Permanent Red F5R），C.I. 15865。

红色粉末，不溶于水、乙醇及二甲苯。溶于盐酸酸性稀乙醇、含乙撑二胺四乙酸的50％乙醇中。溶于硫酸溶液呈红紫色，用水稀释生成蓝红色沉淀。溶于浓硝酸呈褐红色，浓氢氧化钠溶液呈红色。

（44）色淀红D(Lake RedD）C.I. 15500。

橙红色粉末，微溶于沸水，呈橙色。

水溶液加盐酸生成橙色沉淀，加氢氧化钠溶液变暗橙色。溶于硫酸呈暗蓝红色，用水稀释生成橙色沉淀。此外，还有钡盐、钙盐。

（45）蓝色201号（靛蓝， Indigo），C.I. 73000。

暗蓝色粉末，不溶于水、冷乙醇。微溶于四氯化碳、氯仿、溶于吡啶、冰乙醇、硝基苯、二氯丙醇，溶于二甲基甲酞胺，呈深蓝色。硫酸溶液呈黄绿色，加热变成蓝色（生成单或二磺酸）。溶于浓硝酸呈红黄色。300℃升华。

（46）蓝色204号（卡尔庞士林蓝， Carbanthrene Blue），C.I. 69825。

暗蓝色粉末，溶于温氯仿、温吡啶、a-氯萘。不溶于水、乙醇、丙酮、甲苯。

溶于硫酸溶液呈褐黄色，用水稀释生成蓝色的沉淀。

（47）蓝色404号（酞菁蓝， Phthalocyanine Blue），C.I.74160。

蓝色粉末，溶于?-氯萘中呈蓝色。还溶于磷酸、二乙基硫酸、喹啉，但不溶于水。不溶于普通的溶剂、油脂、蜡。本品溶于三氯乙酸的饱合水溶液，加浓硝酸呈紫色。溶于硫酸溶液呈暗绿黄色，用水稀释生成铜酞菁沉淀。此色素的?-氯萘溶液的最大吸收波长是680nm（609，648nm）。 550～580℃下不分解，升华。

（48）图2-3-41表示以上待测溶液中各色素的吸收光谱，各图的序号与注解序号相对应。