羟苯甲酮即2-羟-4甲氧二苯甲酮。（oxybenzone，2-hydroxy-4-methoxybenzo phenone C₁₄H₁₂O₃,228.25）是微黄色结晶粉末，熔点66℃（Merek Index），60～66℃（化妆品原料标准Ⅱ）在100g不同溶媒中溶解的克数分别为：水0.O，95％乙醇5.85，正己烷4.36，苯56.2，二甲苯44.3，二硫化碳30.0，四氯化碳34.5。羟苯甲酮的最大吸收波长（0.001％乙醇溶液）为242±4nm， 288±4nm， 325±14nm,在化妆品中用作紫外线吸收剂。我国化妆品卫生标准规定的最大允许浓度为10％。

1 应用范围

本方法适用于不同类型化妆品中羟苯甲酮的测定。

2 原理

用有机溶剂提取化妆品中的羟苯甲酮，用高效液相色谱进行测定，以保留时间定性，以标准峰高（或峰面积）进行定量。

3 试剂

3.1 四氢呋喃：色谱纯。⁽¹⁾

3.2 羟苯甲酮标准溶液：精确称取羟苯甲酮0.25g，加少量四氢呋喃溶解，移置于100ml容量瓶中。加四氢呋喃定容至刻度。移取5.0ml置于50.0ml容量瓶中，用四氢呋喃定容至刻度。此液1.0ml含250?g羟苯甲酮。

4 仪器

4.1 高效液相色谱仪：具紫外分光检测器。

4.2 超声波仪。

5 分析步骤

5.1 样品预处理

5.1.1 液体、乳状样品：准确称取约0.1～2.5g⁽²⁾样品于50m1离心管中，加四氢呋喃40. 0ml，用超声波仪分散或溶解，加四氢呋喃至50ml，如样液混浊离心分离，取上清液备用。

5.1.2 指甲油：称取约1. 0g⁽³⁾样品，置于离心管中，加四氢呋喃5.0ml经超声波仪超声提取后，加氯仿至20ml，3000r／min离心10min，取上清液备用。

5.2 色谱条件

色谱柱：不锈钢填充柱（4.6mm id×25Onm）填充C₈（5µm）。⁽⁴⁾

流动相：甲醇+四氢呋喃+水+60％过氯酸（50＋20＋30＋0.15）。⁽⁵⁾

流速，1.0m1／min。

检测器：紫外吸收检测器，波长288nm。

5.3 测定

5.3.1 定性

吸取6.0ml标准溶液置于50.0ml容量瓶中,加四氢呋喃定容至刻度，取5µl注入HPLC，求出保留时间。取5µl样品待测溶液注入HPLC，求出保留时间，与标准保留时间,与标准保留时间比较进行定性。^(6,7)

5.3.2 定量

配制每毫升含羟甲氧基苯酮0.0、10.0、20.0、30.0、40.0、50.0?g的标准系列，分别取5µl注入HPLC。绘制峰高（或峰面积）-浓度标准曲线，取样品待测溶液5µl注入HPLC，以标准曲线查出样品溶液中的羟苯甲酮含量（µg/ml）。

6 计算

c%=A×V/m×1/10000

式中：
c－一羟苯甲酮含量，%；

A――以标准曲线查出的样品溶液中羟苯甲酮含量，µg/m1；

V一－样品溶液稀释的总体积，m1；

m一一样品质量，g。

注解：

（1）一般在四氢呋喃中加入了微量的抗氧化剂，故要使用色谱纯的四氢呋喃。

（2）进行样品预处理时，称取的样品质量应含0.5～2.5mg羟苯甲酮。

（3）称取指甲油时，由于样品中的溶媒易挥发，称取操作应敏捷。

（4）可用Lichrosorh RP-18色谱柱（E.Merck公司制品）或Nueleosil C₁₈色谱柱（Macherey Nagel公司制品）。

（5）如用乙腈+水（7+3）作流动相，不能将ESCA LOL 506紫外吸收剂与羟甲氧基苯酮分离。

（6）本方法选择的仪器条件，羟苯甲酮与其它异构体分离良好，羟苯甲酮的相对保留时间为1.00时，其它异构体的相对保留时间如下：2-羟基-4甲氧基二苯甲酚-5磺酸是0. 48，2-羟基二苯甲酮是0.72，2，2′羟基二苯甲酮是0.75，2，2′，4，4′-四羟基二苯甲酮是0.56，2，2′羟基4，4′甲氧苯酮是0.89。