卵磷脂为黄色到棕色半透明蜡状物。具有吸湿性，在空气中色变深，能溶于醇、醚等，在任何pH下均以两性离子状态存在，所以具有表面活性作用。卵磷脂广泛用作化妆品的乳化剂及颜料的悬浮剂。

（一）钼蓝定性法

1 适用范围

本方法适用于化妆品中卵磷脂的测定。

2 原理^（1）

卵磷脂通过层析柱与无机磷和油类杂质等分离后，将卵磷脂无机化，用钼蓝法测定其中的无机磷。

3 试剂

3.1 硅胶（SiO₂·ˇH₂0）：100目，层析用。

3.2 二氨基酚溶液：称取1g2，4-二氨基酚（2，4-Diaminophenol Dihydrochloride）盐酸盐及30g亚硫酸氢钠溶于水中，并稀释至100ml，过滤，保存于暗处，可使用一周。

3.3 8.3％钼酸铵溶液：称取8.3g钼酸铵溶于14ml水和6ml氨水的混合溶液中，并加水至100ml。

3.4 1％氯化胆硷标准溶液：取0.lg氯化胆硷，加水至10ml。

3.5 显色剂：取1ml l0％氯钼酸（H₂PtCl₆）加25ml 4％KI溶液，混匀，并加水至50ml。

4 仪器

层折柱：内径20mm、长110mm附有刻度的玻璃管，底部有No.1半熔玻板及活栓，并联接减压瓶及减压泵。

5 分析步骤

5.1 样品预处理

取5g产品于水浴上加热融化，加20m1氯仿+甲苯（4+1），加温溶解。

取2g硅胶于层析管中，于硅胶上复盖少量玻璃棉，用10m1石油醚淋洗柱子。待石油醚几乎全部流出时，将上述氯徽甲苯样品溶液乘热过柱，调节活栓及减压泵，使溶液流出量保持在4～6ml／min。继续以20m1、20m1、10ml，分次淋洗柱内残存油分。

另接一减压瓶，以15m1、10m1、10ml和10ml乙醇淋洗样品，合并淋洗液，加乙醇至50ml作为待测溶液。

5.2 定性测定

取5ml测溶液置于消化管中,加1～3个玻珠于水浴中蒸去乙醇，残留物中加2m1过氯酸和2滴30％过氧化氢，于火焰上小心加热，待样液几呈无色时⁽²⁾，可加大火力，待样品溶液冷后，加2m1二氨基酚溶液、1ml钼酸铵溶液。若有卵磷腈存在，5min后呈紫蓝色。

注解：

（1）本法灵敏度高，颜色稳定：比层析法简便易于掌握，重复性好。此法是基于卵磷脂中磷的测定。每一脂性磷分子都含有一个磷酸根。卵磷脂分子中磷约占4％，如需定量时将脂性磷换算成卵磷脂的因数一般用25。

（2）本法所采用的高氯酸-过氧化氢消化法可迅速将样品消解，使脂性磷成为正磷酸盐。若样品变为黑色或褐色，说明过氧化氢不够，可重复补加过氧化氢，直至颜色澄明为止。过剩的过氧化氢会影－向下一步磷的比色测定。故此，在消解好之前应加大火力，以赶走剩余的过氧化氢。

（二） 纸层析定性法

1 原理

卵磷脂通过层析柱与油分离后用盐酸水解，使其释放出胆硷，然后用纸层析法与标准胆硷比较其R

2 试剂

见(一)钼蓝定性法。

3 仪器

3.1 回流冷凝器及减压泵。

3.2 层析槽一套。

4 分析步骤

4.1 样品预处理

见钼蓝法。

4.2 定性测定

取20ml待测溶液于50ml烧瓶中，加2ml盐酸，按回流冷凝器，于水浴上加温回流6小时^（1）。在减压下将溶媒馏去仅剩2ml左右，残留液以少量乙醇转入离心管中，于水浴上蒸干，残留物用0.3～0.5ml水溶解，此液用作点样用。

距滤纸底端5cm处，用铅笔划一横线，用微量注射器将0.5?l l％氯化胆硷标准溶液和样品溶液点样于横线上，二点相距约2cm，用乙酸+丁醇+水（1+5+4）作为展开剂，按上行法于室温展开20～25cm⁽²⁾，取出风干，以显色液喷雾。根据标准斑点及样品斑点的蓝色位置判定是否有卵磷脂存在。

注解：

（1）加盐酸并回流6小时，主要使样品水解，同时释放出胆硷。

（2）展开的长度要控制，太短分离不好，太长斑点扩散，不利于观察。