5.4 眼刺激试验
眼刺激性是指眼表面接触受试物后产生的可逆性炎性变化。
5.4.1试验方法的原则
5.4.1.1受试物应以一次剂量或多次剂量滴入（涂入）或喷洒眼内。
5.4.1.2每种受试动物的眼睛应保证无任何炎性反应和眼损伤。
5.4.1.3每组试验功物数至少4只，采用自身对照，首选动物为家兔。
5.4.1.4受试物使用浓度一般用原液或用适当无刺激性赋形剂配制的50％软膏或其他剂型。
5.4.1.5已证明有皮肤刺激性的物质，不必进行本项试验。
5.4.2试验方法
表3皮肤慢性刺激试验评分标准
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皮 肤 改 变
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积分
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最高分
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- 棘层肥厚
轻度（表皮为正常厚度1.5～3倍
中度（表皮为正常厚度3～4倍）
重度（表皮为正常厚度4倍以上）
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1
2
3
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3
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B 角化过度
(b) 颗粒层增厚
（c）角层增厚
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1
1
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1
1
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C 其他表皮改变
（d）颗粒层缺乏
（e）角化不全
（f）表皮细胞空泡化或细胞内水肿或基底细胞液人化变性
（g）海绵形成
棘细胞间水肿
水疱形成
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1
1
1
1
2
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1
1
1
2
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D. 表皮坏死
（h）表皮坏死
轻度（占表皮切面的1／3以下)
中度（占表皮切面的1／3～2／3）
重度（占表皮切面的2／3以上）
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8
10
15
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15
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E. 真皮变化
(i)真皮结缔组织血管扩张充血或水肿
(j)胶原纤维变性或解离
(k)真皮炎性细胞浸润
轻度
中度
重度
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1
1
1
2
3
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1
1
3
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注：①总分按(a＋b＋c＋d＋e＋f＋g)＋(i＋j＋k)或(h)＋(i＋j＋k)选择总分较大者。
②解离指胶原纤维分离成细小碎片。
5.4.2.1一次眼刺激试验
5.4.2.1.1将液态或软膏（0.1ml或l00mg）受试物滴入（涂入）实验动物一侧结膜囊内，另一侧眼作为对照。滴药后使眼被动闭合5～l0s，记录滴药后6、24、48和72h眼的局部反应，第4、7天观察恢复情况。观察时应用荧光素钠检查角膜损害，最好用裂隙灯检查角膜透明度、虹膜纹理改变。
5.4.2.1.2如果受试物明显引起眼刺激反应，可再选用6只动物，将受试物滴入一侧结膜囊内，接触4s或30s后用生理盐水冲洗干净，再观察眼的刺激反应。
5.4.2.1.3按表4所列眼损害分级标准积分，再按表5进行眼刺激强度的评价。
5.4.2.2多次性眼刺激试验将受试物原液0.lml或配制成的50％软膏约l00mg滴入或涂入一侧结膜囊内，另一侧眼作为对照，每日一次，连续14天。实验结束后，继续观察7～14天，按表4分级标准记录眼的刺激反应，并按表5眼刺激性评价标准进行眼刺激强度的评价。
表4 眼损害的分级标准
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眼 损 害
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积分
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角膜:A.混浊(以最致密部位为准)
无混浊
散在或弥漫性混浊,虹膜清晰可见
半透明区易分辨,虹膜模糊不清
出现灰白色半透明区,虹膜细节不清,瞳孔大小
勉强看清
角膜不透明,由于混浊,虹膜无法辨认
B.角膜受损范围
<1/4
1/4～1/2
1/2～3/4
3/4～1
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0
1
2
3
4
1
2
3
4
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积分A×B×5 最高积分为80
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虹膜:A.正常
皱褶明显加深,充血、肿胀、角膜周围有轻度充
血，瞳孔对光仍有反应
出血、肉眼可见破坏，对光无反应(或出现其中之一反应)
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0
1
2
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积分A×5最高积分为10
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结膜：A充血，系指睑结膜、球结膜部位
血管正常
血管充血呈鲜红色
血管充血呈深红色，血管不易分辨
弥漫性充血呈深红色
B水肿
无
轻微水肿(包括瞬膜)
明显水肿,伴有部分眼睑外翻
水肿至眼睑近半闭合
水肿至眼睑超过半闭合
C.分泌物
无
少量分泌物
分泌物使眼睑和睫毛潮湿或粘着
分泌物使整个眼区潮湿或粘着
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0
1
2
3
0
1
2
3
4
0
1
2
3
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总积分
(A＋B＋C)×2最高积分为20 |
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角膜、虹膜和结膜反应累加最高积分为
110 |
表5 眼刺激性评价标准
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急性眼刺激积分指数
（I、A、O、I）
(最高数)
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眼刺激的平均指数
（M、I、O、I）
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眼刺激个体指数
（I、I、O、I）
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刺激强度
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0～5
5～15
15～30
30～60
60～80
80～110
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48h后为0
48h后<5
4日后<5
7日后<20
7日后<40
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7日后
(6/6动物<30)
(4/6动物<10)
7日后(6/6动物<60)
(4/6动物<30)
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无刺激性
轻刺激性
刺激性
中度刺激性
中度～重度刺激性
重度刺激性
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5.4.3结果评价按上述分级评价标准评定，如一次或多次接触受试物，不引起角膜、虹膜和结膜的炎症变化，或虽引起轻度反应，但这种改变是可逆的，则认为该受试物可以安全使用。在许多情况下，哺乳动物眼的反应较人敏感，从动物试验结果外推到人可提供较有价值的依据。
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