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Procedures and methods of safety evaluation
for cosmetics
1. 目的
为向广大消费者提供符合卫生要求的化妆品，防止化妆品对人体产生近期和远期危害,特制定本程序和方法。
2. 适用范围
本程序和方法适用于在我国生产和销售的一切化妆品原料和化妆品产品。
3. 化妆品安全性评价程序
3.1第一阶段 急性毒性和动物皮肤、粘膜试验
3.1.1急性毒性试验
3.1.1.1急性皮肤毒性试验。
3.1.1.2急性经口毒性试验。
3.1.2.动物皮肤、粘膜试验
3.1.2.1皮肤刺激试验。
3.1.2.2眼刺激试验。
3.1.2.3皮肤变态反应试验。
3.1.2.4皮肤光毒和光变态反应试验。
3.2第二阶段 亚慢性毒性和致畸试验
3.2.1亚慢性皮肤毒性试验。
3.2.2亚慢性经口毒性试验。
3.2.3致畸试验。
3.3第三阶段 致突变、致癌短期生物筛选试验
3.3.1鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验（Ames试验）。
3.3.2体外哺乳动物细胞染色体畸变和SCE检测试验。
3.3.3哺乳动物骨髓细胞染色体畸变率检测试验。
3.3.4动物骨髓细胞微核试验。
3.3.5小鼠精子畸形检测试验。
3.4第四阶段 慢性毒性和致癌试验
3.4.1慢性毒性试验。
3.4.2致癌试验。
3.5第五阶段 人体激发斑贴试验和试用试验。
4 对化妆品原料和化妆品产品安全性评价的规定
4.1凡属于化妆品新原料，必须进行五个阶段的试验。
4.2凡属于含药物化妆品必须进行动物急性毒性试验、皮肤与粘膜试验和人体试验，但是根据化妆品所含成分的性质、使用方式和使用部位等因素，可分别选择其中几项甚至全部试验项目。
4.3凡属于化妆品新产品必须进行动物急性毒性试验，皮肤与粘膜试验和人体试验，但是根据化妆品所含成分的性质、使用方式和使用部位等因素，可分别选择其中几项甚至全部试验项目。
4.4凡进口化妆品应由进口单位提供安全性评价资料。
5.化妆品安全性评价试验方法
5.1 急性皮肤毒性试验
5.2 急性经口毒性试验
5.3 皮肤刺激试验
5.4 眼刺激试验
5.5 皮肤变态反应试验
5.6 皮肤光毒和光变态反应试验
5.7 人体激发现斑贴试验和试用试验
5.8 亚慢性皮肤毒性试验
5.9 亚慢性经口毒性试验
5.10 致畸试验
5.11 慢性毒性试验
5.12 致癌试验
5.13 鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验（Ames）试验
5.14 体外哺乳动物细胞的染色体畸变和SCE检测试验
5.15 哺乳动物骨髓细胞染色体畸变率检测试验
5.16 动物骨髓嗜多染细胞微核试验
5.17 小鼠精子畸形检测试验
附 录 A
实验动物体表面积估算方法(补充件)
A.1兔
S＝K·m2/3...........................(A1)式中：S───体表面积，cm2；
K───常数，一般成年家兔为10；
m───动物体重，g。例：体重2kg成年家兔体表面积：
S＝10×20002/3
lgS＝lg10＋2/3lg2000＝1＋0.6667×3.3010＝1＋2.2008＝3.2008查反对数表：S＝l588cm2
A.2豚鼠
S＝K·m2/3..............................(A2)式中：K───常数，K＝9.26；
m───动物体重，g。例：体重438g之豚鼠的体表面积：
lgS＝lg9.26十2/31g438＝0.9666＋2/3×0.8805＝0.9666＋1.7610＝2.7276查反对数表：S＝534cm2
A.3大鼠、小鼠
S＝0.0913m2/3...........................(A3)式中：S───体表面积，cm2；
m───动物体重，kg。例：体重200g大鼠之体表面积：
S＝0.0913×（0.2)2/3
lgS＝1g0.0913＋2/31g0.2
查反对数表：S＝0.03123m2＝312.3cm
附 录 B
化学物质毒性的LD50计算方法
B.1霍恩氏法（Horn）一般各剂量组使用5只动物，常用的剂量系列有两排：
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1.0
2.15
4.64
10.0
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×10t
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1.0
3.16
10.0
31.6
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×10t
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t＝0，±1，±2，±3.....前排系列的剂量间距较后排系列为小，结果较为精确，所以一般常选用之。预备试验：通常采用10，100和1000mg／kg的剂量，各剂量使用2～3只动物。根据24h内动物死亡情况，估计LD50的可能范围，以确定正式试验所用的剂量。正式试验：按预试所确定大概的致死剂量范围选用一组适宜的剂量系列，根据四个剂量组的动物死亡数，从Horn氏法LD50计算用表中，可求出LD50值及其可信限。此法的优点是简单易行，使用动物少，可用来初步了解受试物的毒性强弱。缺点是所得LD50的可信限范围较宽，不够精确。
B.2机率单位—对数图解法先把剂量的对数值和相应反应的机率单位用点代表画在图上（用机率对数图纸直接把剂量和死亡百分数画在图上）。画线时应照顾所有图上各点，使点散布在线的上下，并使线上点的距离和线下点的距离能相互抵消，特别注意在死亡率15％到85％间的点，机率单位4与6之间的点，尽量使线接近这部分的点。当直线划定后，由图直线上50％死亡率（机率单位为5）的相应剂量对数值，就是半数致死量（LD50）的对数值，经反对数变换后即得LD50的剂量。半数致死量（LD50）的可信限估计：先求LD50的标准差S：
S＝(X2 - X1)/( Y2 - Y1)．．．．．............................(B1)
X2、X1相当于Y2＝6、Y1＝4(概率单位)时相应的X轴上的对数剂量。估计logLD50的标准误：
 ...........................(B2)
式中：Nˊ───反应为16～84％之间所用试验动物数。半数致死量对数值的95％可信限为logLD50＋1.96S
logLD50，经反对数充换后，可得到LD50的95％可信限剂量。该法要求：一般每剂量组使用不少于10只动物，但各组动物数不一定均等。此法不要求剂量组呈等比关系，但等比可使各点距离相等，利于作图。本法优点是，不需烦琐的计算。
B.3寇氏法（Karbermettod）该法是一种计算简便，易于理解，而且计算结果比较准确的一种方法。依本方法设计时，剂量范围可宽些，剂量组必须多，但组间对数剂量差（组距）可以小些。预备试验：一般应求得动物全死（或90％以上死亡的剂量）和动物不死亡（或10％以下死亡的剂量），分别作为正式试验的最高与最低剂量。正式试验：一般设5～10个剂量组。将上述最高、最低剂量均换算为常用对数，然后将最高、最低剂量的对数差，按所需要的组数，分为几个对数等距（也可以不等距）的剂量组。试验结果的计算和统计：
1.列出试验数据及其计算表：包括各组剂量（mg／kg）、对数剂量（X）、动物数（n）、动物死亡数（r）、动物死亡百分比（p，以小数表示）以及统计公式中要求的其他计算数据项目。
2.LD50的计算公式：根据试验条件及试验结果，可分别选用下列三个公式中的一个，求出logLD50。
① 按本试验设计得出的任何结果，均可用式（B3）：1ogLD50＝1/2∑（XI+Xi+1）（Pi+1- Pi）...........（B3）
式中：
Xi与Xi+1及Pi与Pi+1分别为相邻两组的剂量对数以及动物死亡百分比。②
按本试验设计，且各组间剂量为对数等距时，可用式（B4）：
. logLD50＝Xk一d／2∑（Pi十Pi+1）...........（B4）
式中：
Xk──最高剂量对数；
d──相邻两剂量对数值的差数。 ③ 若试验条件同②，且最高、最低剂量组动物死亡百分比分别为，1.0（全死）和0（全不死)时，则可用更便于计算的式(B5)：
1ogLD50＝Xk—d（∑P—0.5）................（B5）式中：∑P──各组动物死亡百分比之和。
3.标准误与95％可信限① 1ogLD50的标准误（S）：
SlogLD50=d[(
∑P-∑P)2/n]1/2................(B6) ②95％可信限＝log-1(logLD50±1.96SlogLD50）.........（B7）
附 录 C
化学物质的急性毒性（LD50）分级(补充件)
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级别
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大鼠经口LD50(mg/kg)
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兔涂皮LD50(mg/kg)
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极 毒
剧毒
中等
毒低
毒实际无毒
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<1
≥1～50
≥50～500
≥500～5000
≥5000
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<5
≥5～44
≥44～350
≥350～2180
≥2180
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附加说明：本标准由中国预防医学科学院环境卫生监测所归口。本标准由“化妆品安全性评价程序和方法”起草小组负责起草。本标准主要起草人徐凤丹、贺锡雯、秦钰慧、刘景忠。
本标准由中国预防医学科学院环境卫生监测所负责解释。
中国疾病预防控制中心环境与健康相关产品安全所
信息室
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