硬酯酰甘草酸是白色略带黄色的结晶性粉末，熔点70～77℃，乙醇溶液的最大吸收波长是248nm。

1 应用范围

本方法适用于化妆品中硬酯酰甘草酸的定性及定量。

2 原理

以有机溶剂提取化妆品中的硬酯酰甘草酸，用高效液相色谱进行分析，以保留时间定性，以峰高或峰面积进行定量。

3 试剂

3.1 丙酮：分析纯。

3.2 氯仿：分析纯。

3.3 硬酯酞甘草酸标准溶液：准确称取硬酯酰甘草酸（glycyrrhizicacid stearyl C₄₂H₆₂0₁₈）500.0mg，用少量氯仿溶解，移入100ml容量瓶中并定容至刻度。此溶液1.0ml含硬酯酰甘草酸5.0mg。吸取此液5.0ml置于50ml容量瓶中，以丙酮+氯仿（9+1）溶液稀释至刻度。此溶液1.0ml含500?g硬酯酞甘草酸。

4 仪器

4.1 高效液相色谱仪：具紫外吸收检测器。

4.2 超声波仪。

5 分析步骤

5.1 称取约1.0～2.5g样品⁾¹⁾，置于50ml离心管中，同时做试剂空白，加20ml丙酮+氯仿（9+1）溶液⁽²⁾，用超声波分散或溶解后稀解至50ml，溶液混浊时离心，取上清液作为待测溶液⁽³⁾。

5.2 色谱条件

色谱柱：C₁₈不锈钢填充柱（内径4.6mm×250mm）。

柱温：室温。

流动相：甲醇。

流速：1.0m1／min。

进样量： 15?l。

检测器：紫外吸收检测器。

5.3测定

5.3.1定性

吸取标准溶液2ml，加丙酮+氯仿：（9+1）榕液至50m1，取15?1注入液相色谱仪，求出硬酯酰甘草酸的保留时间。取样品溶液15?1与标准同样操作，其保留时间与标准保留时间比较进行定性。

5.3.2 定量

吸取标准溶液用丙酮-氯仿（9+1）溶液稀释，配制成1m1含10.0、20.0、30.0、40.0?g的标准系列。分别取15?l注入液相色谱仪，记录峰高或峰面积。绘制标准曲线。

取待测样品溶液15?1注入液相色谱仪，记录峰高或峰面积，由标准曲线查出硬酯酰甘草酸的含量A（?g/m1）。

6 计算

c=A×V/m×1/1000

式中：c——硬酯酰甘草酸含量，%；

A——从标准曲线查出的样品溶液中硬酯酰甘草酸的浓度，?g/m1；

V——样品溶液稀释的总体积，ml;

m——样品质量，g。

注解：

（1）称取的样品中应含0.5～2mg硬酯酰甘草酸。

（2）样品溶解不好时，用甲醇+氯仿（1+1）溶液进行溶解。配制标准曲线也用相同的溶媒。