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实验动物-大鼠冠状病毒/涎泪腺炎病毒检验方法
GB/T 14926.32—94

1 主题内容与适用范围

  本标准规定了大鼠冠状病毒/涎泪腺炎病毒抗体的检验方法,设备和试剂等。适用于检测实验大鼠群的大鼠冠状病毒/涎泪腺炎病毒的感染情况。

2 引用标准

  GB/T 14926.18 实验动物 淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒检验方法

3 材料和试剂

3.1 大鼠冠状病毒(RCV)毒种。来自美国ATCC。

3.2 鼠肝炎病毒MHV1、MHV3、A59、JHM等的毒种。

3.3 大鼠肾原代细胞。

3.4 DBT 传代细胞。

3.5 ELISA、IFA和IEA所需的设备、材料和试剂等见GB/T 14926.18中4.1和 4.2。

4 检验步骤

4.1 玻片抗原RCV 接种大鼠肾原代细胞,约2天,待病变达“++”时涂片。涂片、鉴定和保存见GB/T 14926.18中4.2.3。

4.2 ELISA 抗原:见鼠肝炎病毒检验。

4.3 阳性血清:RCV/SDAV病毒液免疫SPF大鼠获得的阳性血清,ELISA滴度≥1∶1 280,IFA或IEA滴度≥
1∶160。

4.4 阴性血清:确证无RCV感染的SPF大鼠群血清。

5 检验方法和结果判定

5.1 ELISA法:是首选的方法,使用鼠肝炎病毒多价ELISA抗原,酶结合物用 抗大鼠IgG辣根过氧化物酶结合物。操作步骤和结果判定见GB/T 14926.18中4.1.3 待检血清1:40阳性,经重试或用ELISA阻断试验重试仍为阳性判阳性。

5.2 IFA或IEA法:亦可使用,用RCV玻片抗原,用抗大鼠IgG荧光结合物(作 IFA)或抗大鼠IgG酶结合物(作IEA)操作步骤和结果判定见GB/T 14926.18中4.2.4。 待检血清1:5阳性经重试(本法或另一法)仍为阳性判阳性。

6 结果报告

  根据结果判定作出报告。

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