1 主题内容与适用范围

　　本标准规定了兔轮状病毒抗体的检验方法、试剂等。适用于检测兔群的兔轮状病毒感染情况。

2 引用标准

　　GB／T 14926.18　实验动物　淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒检验方法

3 设备、材料和试剂

3.1 猴轮状病毒SA₁₁株毒种。

3.2 MA-104细胞系。

3.3 ELISA、IFA和IEA方法所需的设备、材料和试剂见GB／T 14926.18中4.1和 4.2。

4 检验步骤

4.1 ELISA 抗原的制备：SA₁₁毒种接种MA-104细胞，37℃孵育2～3天，细胞病变达“＋＋＋～＋＋＋＋”时收获培养物，冻融三次，超速离心收集沉淀物作为抗原。抗原的滴定、分装和保存见GB／T 14926.18中4.1。

4.2 玻片抗原的制备：SA₁₁病毒接种MA-104细胞，37℃孵育2～3天细胞病变达“＋＋～＋＋＋”时涂片。涂片、鉴定和保存见GB／T14926.18中4.2.3。

4.3 阳性血清的来源：选择自然感染轮状病毒抗体滴度高的兔阳性血清，亦可用SA₁₁病毒液免疫兔获得的阳性血清。

4.4 阴性血清：确证无轮状病毒感染的兔群的血清。

5 检验方法和结果判定

5.1 ELISA法：为首选的方法，使用SA₁₁株的ELISA抗原。酶结合物用抗兔IgG酶结合物或SPA-酶结合物均可。操作步骤和结果判定见GB／T 14926.18中4.1.3。待检血清1∶40阳性，经重试或用IFA重试仍为阳性判阳性。

5.2 IFA或IEA法：亦可使用，用SA₁₁的抗原片，用抗兔IgG荧光结合物或酶结合物。操作步骤和结果判定见GB／T 14926.18中4.2.4。待检血清1：5阳性经重试仍为阳性判阳性。

6 结果报告

　　根据结果判定作出报告。