1 主题内容与适用范围

　　本标准规定了小鼠细小病毒（以下简称MVM）的检验方法、试剂等，适用于检测实验小鼠群的MVM的感染情况。

2 引用标准

　　GB／T 14926.18　实验动物 淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒检验方法

　　GB／T 14926.24　实验动物 小鼠肺炎病毒检验方法

3 材料和试剂

3.1 MVM毒种。

3.2 SPF小鼠或大鼠胚原代或次代细胞。

3.3 豚鼠红细胞。

3.4 酶标仪。

3.5 荧光显微镜。

3.6 离心机。

4 检验步骤

4.1 制备血凝素抗原：将MVM病毒接种原代或次代大鼠或小鼠胚细胞，约7～12天，当细胞病变（CPE）达＋＋～＋＋＋时收获，经冻融三次，3000r／min离心10～15min，取上清液。

4.2 制备ELISA抗原：同上述血凝素抗原，当细胞病变（CPE）达＋＋＋时收获，浓缩提纯方法见GB／T 14926.18中4.1.2.2。

4.3 制备IFA，IEA抗原片：当MVM感染鼠胚细胞约7～12天，将细胞用胰酶消化分散，涂片，制片的操作程序，抗原的鉴定和保存见GB／T 14926.18中4.2.3。

4.4 制备MVM小鼠免疫血清：将MVM感染的鼠胚细胞，经冻融，提纯的抗原免疫小鼠，每周腹腔注射一
次，0.1mL／只，共四次，第五周放血。

4.5 制备MVM阴性血清：采集无MVM病毒感染的小鼠血清。

5 检验方法和结果判定

5.1 HI法，用8个单位血凝素，待检样品HI抗体滴度达1∶20时判为阳性。方法见GB／T 14926.24中5.3。

5.2 ELISA法：见GB／T 14926.18中4.1。

5.3 IFA法：见GB／T 14926.18中4.2。

　　当检样出现阳性时，选用同一种方法或另一种方法重试。 如为阳性则判为阳性结果。

6 结果报告

　　根据判定结果，作出报告。