1 主题内容与适用范围
本标准规定了实验动物的仙台病毒检验方法和试剂等,适用于检测大鼠、小鼠、豚鼠、地鼠、家兔等实验动物群中仙台病毒的感染情况。
2 引用标准
GB/T 14926.18 实验动物 淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒检验方法
GB/T 14926.24 实验动物 小鼠肺炎病毒检验方法
3 设备、材料和试剂
3.1 仙台病毒毒种。
3.2 鸡胚。
3.3 BHK-21 传代细胞。
3.4 酶标仪。
3.5 生物显微镜。
3.6 恒温培养箱。
3.7 冰箱。
3.8 微量震荡器。
3.9 微量血凝反应板(u型)。
3.10 微量加样器。
4 检验步骤
4.1 仙台病毒ELISA、HI抗原制备:将仙台病毒接种9~10日龄鸡胚尿囊腔,培养于36℃温箱,72h后收
于4℃,次日无菌收取尿囊液,2000r/min离心30min,用0.5%豚鼠或鸡血球悬液作血凝试验,血凝效
价在640倍以上者,用仙台病毒阳性血清作血凝抑制试验,证明有特异性者即可用作仙台病毒抗原。
4.2 仙台病毒抗原片制备:用仙台病毒感染BHK-21细胞,待细胞病变达++-+++时,将感染细胞制成抗原片。
4.3 阳性血清 用仙台病毒免疫SPF小鼠、大鼠等动物,制成阳性血清。
4.4 阴性血清 确证无仙台病毒感染的SPF小鼠、大鼠等动物血清。
5 检验方法
5.1 采用ELISA(见 GB/T 14926.18中4.1)方法或IEA(见
GB/T 14926.18中4.2)方法或HI(见GB/T 14926.24中5.3)方法进行血清学检验。
5.2 当标本出现阳性结果时,则选用同一方法或另一方法重试,结果阳性则判为阳性。
6 结果报告
根据判定结果作出报告。
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