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HPLC法测定胃脘舒冲剂中甘草酸的含量
朱兰  孔德云 吴晓明

摘 要 
用高效液相色谱法测定胃脘舒冲剂中甘草酸的含量,采用?Bondapak C18柱,3.9 mm×300 mm,流动相甲醇-1.5 mol/L 冰醋酸水溶液(68∶32),流速1.0 mL/min,检测波长254 nm,测定结果平均回收率为97.41%,RSD=1.2%。

Determination of Glycyrrhizic Acid in Weiwanshu Granules by HPLC

  Zhu Lan, Wu Xiaoming and Kong Deyun
(Shanghai Institute of Pharmaceutical Industry, Shanghai 200040)

  Astract  HPLC method was developed for the determination of glycyrrhizic acid in Weiwanshu granu-
les, a preparation containing Radix Glycyrrhizae, Codonopsis and Paeoniae alba etc. for the regulation of gastric acidity to protect gastric mucosa.
? Bondapak C18 column was used with a mobile phase of methanol-1.5 mol/L acetic acid (6832) and detected at 254 nm. The flow rate was 1.0 mL/min. The extraction recovery was 97.41%(RSD=1.2%). The method was simple, rapid and well reproducible. It can be used as a reliable method for the quality control of Weiwanshu granules.
  Key words  Weiwanshu granules glycyrrhizic acid

  胃脘舒冲剂为上海宝龙药业公司生产,主治萎缩性胃炎的新药。主要有党参、甘草、白芍、延胡索等药材组成,具有补中益气、理气增酸、保护胃粘膜、消炎和解痉止痛等功效。该药的含量测定原采用薄层层析-紫外分光光度测定产品中甘草酸的方法〔全山丛,等.中药新药与临床药理,1996,7(4):40〕,但其操作步骤较为繁杂,现用HPLC法进行甘草酸的含量测定,结果显示该法简便、准确、重现性好,可达到控制本产品质量的目的。

1 仪器与试剂

  仪器:美国Waters高效液相色谱仪,配有Model 510 泵,U6K进样器,Waters 484可变波长紫外检测器;CDMC-2A色谱数据处理机(上海计算技术研究所)。
  试剂:甘草酸对照品,本院中药室提供;胃脘舒冲剂,上海宝龙药业公司提供。甲醇、乙醇、冰醋酸均为分析纯,水为重蒸水。

2 实验部分

2.1 色谱条件:色谱柱:?Bondapak C18,3.9 mm×300 mm;流动相:甲醇-1.5 mol/L冰醋酸水溶液(68∶32);流速:1.0 mL/min;柱温:室温;检测波长:254 mm;灵敏度:0.02 AUFS;进样量:10 ?L。
2.2 标准曲线的制备:精密称取干燥至恒重的甘草酸对照品10.6 mg于100 mL容量瓶中,用甲醇溶解并稀释至刻度。取此溶液分别进样2.5、5、10、12.5、15 µL,在上述色谱条件下测定,记录峰面积与进样量。甘草酸在0.26~1.59 µg范围内峰面积Y与进样量X(µg数)线性关系良好,其回归方程为:Y=4635+2.942×105X,r=0.9998。
2.3 回收率试验:取已知含量的产品,分别加入一定量的甘草酸对照品,按样品测定项下处理,进样10 µL,结果回收率为97.41%,RSD=1.2%。
2.4 样品测定:取本品适量,研细,精密称取约0.5 g,置25 mL容量瓶中,加50%乙醇至刻度,超声波处理30 min,冷却至室温,用50%乙醇调至刻度,溶液通过0.5 µm滤膜过滤,取此溶液与0.1 mg/mL的甘草酸对照品溶液各10 µL,进样测定,以外标法进行计算。对照品溶液与样品溶液色谱图见图1,6批样品中甘草酸含量见表1。

 

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Ⅰ-甘草酸
图1 HPLC图谱

表1 6批胃脘舒冲剂中甘草酸的含量测定

批号 971202 971203 980101 980102 980103 980104
含量(%) 0.264 0.224 0.222 0.229 0.207 0.235
2.5 精密度试验:对于同一甘草酸对照品,在上述色谱条件下,连续进样5次,结果求得RSD为0.78%,说明系统稳定性良好。

2.6 重现性试验:取胃脘舒冲剂,按样品测定项下操作,结果:得平均含量0.1982%,RSD为0.48%。

3 结果与讨论3.1 样品的处理经用50%乙醇索氏提取器加热回流1.5 h,50%乙醇超声波处理0.5 h及50%乙醇超声波处理 1 h,含量测定结果显示三种方法效果相同,考虑到方法简便性,采用50%乙醇超声波处理0.5 h作为提取方法。

3.2 本法测定胃脘舒冲剂中甘草酸的含量,方法简便、准确、重现性好,可作为质量检验的一个定量方法。

作者单位:朱 兰  孔德云 上海医药工业研究院(200040)
     吴晓明 上海宝龙药业公司

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