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两种比浊法检查氯化物的比较
李 祥 福

  中国药典(1990年版)检查氯化物系用俯视比浊法(简称垂视法)。此法有观察面积小、比浊的清晰度低、当检品的Cl-浓度与对照品接近时检出率下降、受环境光线影响等缺点。而用澄明度检测仪比浊法(简称平视法),对克服上述缺点可有帮助。笔者参照、模拟中国药典对氯化物的检查方法,设计了灵敏度、检出率对照实验对上述两法进行了比较。

1 仪器与试剂
  CYJ-A型澄明度检测仪:50WA型比色管(天津玻璃仪器厂),标准氯化钠溶液、硝酸银试液均按中国药典(1990年版)附录配制。

2 实验与结果
2.1
 灵敏度对照实验 中国药典(1990年版)规定有些药品Cl-的限度是用反应的灵敏度来控制的(如蒸馏水等)。实验参照中国药典对蒸馏水中Cl-的检查方法,考察两法在灵敏度检查时是否存在差异。取一组比色管,加水适量,按顺序分别加入标准氯化钠溶液(10µg/ml,Cl-)0.0、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7ml,摇10s,每管加硝酸1.0ml,摇10s,分别加硝酸银试液1.0ml,加水至50ml,摇匀,在暗处放置5min,立即将空白对照管分别与各供试管用垂视法与平视法(检测仪的照度调整在1000~2000lx,置比色管于伞棚边缘外,对着黑背景比浊)进行观察比较。10次的实验结果表明:两法均能在≥0.5ml样管处比较出差异,说明两法做灵敏度检查时比浊的效果一致,而实际观看时的清晰度平视法为优。
2.2 检出率对照实验 中国药典(1990年版)规定的限量查Cl-的药品,其对照液中Cl-的浓度范围是5~100µg/50ml。实验考察两法在该范围的上、下限检出率有无不同。下限选4个样点,Cl-的梯度为4、5、6、7µg/50ml;上限选5个样点,Cl-的梯度为90、100、110、120、130µg/50ml。按上、下限分组,模拟中国药典(1990年版)对Cl-的限量检查方法进行,操作程序与灵敏度实验相同;不同的是比浊时应按梯度的顺序,用相邻的两管互为对照,依次进行两两比较;能分辨出高低差异的记“+”,不能分辨出的记“-”。实验结果见表1。

表1 两法检出率对照实验结果(n=7)

标准Cl-梯度
(µg/50ml)
对照判断结果 标准Cl-梯度
(µg/50ml)
对照判断结果
垂视法 平视法 垂视法 平视法
下 限 4 + +   110 - +
  5 + +   120 - +
  6 - +   130 - -
  7 - - 检出率(%) 44.4 77.8
上 限 90 + + 配对ˇ2统计 ˇ2关联性=12.18>ˇ20.001=10.83,P<0.001
  100 + + ˇ2优势性=19.05>ˇ20.001=10.83,P<0.001

  统计分析表明:两法检出率的关联性极好,上、下限检出的结果一致;平视法的检出率在相同梯度的较高浓度时具有优势性(曾经在中限30~60µg/50ml段,取梯度差为5µg做检出率实验,结果与上限的检出率相同)。检出率的高低也反映了比浊时清晰度的优劣,从实际观察比浊的效果看,不管能否比较出高低差异,平视法的清晰度均优于垂视法。
2.3 两法对照检查氯化物实例 结果见表2。实例对比说明:平视法比浊的清晰度优于垂视法;平视法无论是白天或黑夜均能进行比浊检查,而垂视法在夜间借助灯光进行比浊则分两种情况:如果对照管与样品管Cl-的浓度相差较小或Cl-的限度很低时,垂视法比浊不能得出结果,只有当对照与样品管Cl-的浓度相差很大时才能在夜间进行。

表2 两法检查氯化物实例对比

检 品 名 称 来  源 白天检查结果 清晰度 夜间检查结果
垂视 平视 垂视 平视 垂视 平视
蒸馏水 本院制剂室 ×
注射用水 同上 ×
氯  仿 浙江金华厂 ×
碳酸氢钠(注射用) 重庆制药六厂
葡萄糖(注射用) 重庆制药五厂
枸橼酸钠(注射用) 广东台山新宁
硫酸镁 自贡制药厂 ×
硼  酸 同上 ×
磷酸氢钙 重庆弹子石 ×
  注:“√”表示符合药典规定;“×”表示在夜间检查不能得出结果

3 小结与讨论
  (1)考察结果表明:两法在中国药典规定的氯化物检查比浊的限度范围(灵敏度、上下限)内,检出的结果一致;但平视法比浊的清晰度普遍优于垂视法,也能在夜间做比浊检查,而且还能在比浊浓度较高时检出率增加,这正是比浊检测所要追求的“灵敏性”。平视法比浊因为在澄明度检测仪的光源照度下,能有效地增大氯化银颗粒对光的散射等物理作用;同时改垂视为平视后适合人的视觉习惯,更重要的是增加了观察面积从而增大了人的视角;并且从圆柱型玻管外看内容物还有放大作用。平视法与垂视法相比更具先进性、科学性和实用性,而澄明度检测仪已是普及设备,故建议将此法经过验证收入药典。
  (2)中国药典(1990年版)规定溶液有颜色的药品查Cl-用内消色法来消除颜色干扰。笔者曾经以中国药典(1990年版)附录规定的最高色调(10号)为检测溶液的颜色,考察两法在各种色调溶液中比浊查Cl-的灵敏度和检出率,结果是平视法优于垂视法。
  (3)据考察,每50ml比浊液中Cl-含量≤750µg时,生成AgCl后
,形成的颗粒悬浮作用强,摇匀后静放1h也没有沉淀发生。而药典规定比浊液浓度的最高限为100µg/50ml,因此在药典范围内用平视法比浊,无须考虑氯化银颗粒沉降的影响。
  (4)灵敏度实验所得的结果,计算其Cl-的检出限量和最低浓度分别是:m=5µg,c=0.1ppm。
  (5)做实验时加试剂的顺序不宜颠倒,每管要注意摇匀,比浊过程宜在5min内,对照、供试管的位置在比浊时要互换,用平视法比浊时室内的光照宜暗些。

(原载《药物分析杂志》1994年第4期)

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