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用比色法测定头孢曲松钠的含量

刘　学　斌

　　头孢曲松钠是具有广谱抗菌作用的第三代头孢菌素。该药疗效显著，是由瑞士Roche公司于80年代初推出上市的。目前国内已有厂家生产。据文献报道，头孢曲松钠的含量测定方法有：HPLC法，紫外、可见分光光度法，极谱法等等。
　　为了便于头孢曲松钠生产过程的质量控制，本文采用亚硝酸钠与头孢曲松钠侧链上的2-氨基噻唑环和7位乙酰胺基上的2-烷氧亚胺起反应，形成鲜红色的有色物，在500nm处用比色法测定头孢曲松钠干粉或水溶液的含量，方法简单，操作时间短，经与HPLC法比较，结果基本一致。

1　仪器、试剂和样品
　　仪器：760CRT双光束紫外、可见分光光度计，上海第三分析仪器厂。
　　试剂：磷酸、亚硝酸钠均为A、R级试剂，头孢曲松钠对照品(本厂自制)，头孢曲松钠(本厂生产)。
2　测定条件的确定
2.1　吸收波长的选择　取头孢曲松钠对照品约0.1g，精密称定，置200ml容量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取该溶液20ml置另一100ml容量瓶中，加入5ml0.5%H₃PO₄，摇匀，再加入7ml0.5%NaNO₂溶液，用水稀释至刻度，用相当量试剂作空白，放置30分钟后，用760CRT双光束紫外、可见分光光度计作波长扫描，记录400～800nm处可见光吸收图谱(图1)，有色物在500nm处有最大吸收，故选用500nm处为测定波长。
2.2　显色条件的选择　头孢曲松钠的显色反应，必须在低温和酸性介质中进行。溶液的酸度、温度对显色的时间及有色物的稳定性都有影响。经实验发现，大部分无机酸或有机酸在低浓度条件下都可以作为显色反应的介质，如乙酸、硫酸、盐酸、丙二酸等等，但以磷酸和柠檬酸为好。提高酸度，可缩短显色完全时间，但酸度过高，溶液易出现混浊，影响比色的准确性。本文用0.5%H₃PO₄调节酸度，加入亚硝酸钠显色后，采用时间扫描方式，在500nm处测定其吸光度，结果表明，在室温下25～55min即显色完全，吸光度保持稳定30分钟左右。
2.3　其他杂质的影响　头孢曲松钠的合成路线一般是由7-ACT和侧链酯经反应而得。在头孢曲松钠测定条件下，7-ACT和侧链酯与亚硝酸钠不反应，无有色物生成，不干扰测定。(见附图)。

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注：1为头孢曲松钠；2为侧链酯；3为7-ACT
附图　可见光吸收图谱

2.4　标准曲线的制备　用头孢曲松钠对照品，分别配制成40、60、80、100、120和150µg/ml等系列浓度的标准溶液，按照1.方法，在500nm波长处测定其吸收度。结果表明，头孢曲松钠在40～150µg/ml范围内，吸收度与溶液浓度呈良好的线性关系，得标准曲线回归方程为：
　　　　　　　　A=1.066×10^-2C-6.017×10^-1
r=0.999
2.5　回收率试验　分别取头孢曲松钠样品及对照品各0.1g，精密称定，分别置200ml容量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取样品溶液20ml和对照品溶液10ml，置另一100ml容量瓶中，加入5ml0.5%H₃PO₄，摇匀，再加入7ml0.5%NaNO₂溶液，用水稀释至刻度，放置30分钟后，用水作空白，在500nm处测定其吸收度，用上述回归方程计算回收率。结果测得其平均回收率为100.6%，RSD为1.12%(n=5)。

3　样品的测定
　　分别取头孢曲松钠干粉或头孢曲松钠水溶液适量，用水配制成500µg/ml溶液，精密量取20ml，自“置另一100ml溶量瓶中，……”开始，照回收率试验项下依法测定，并与HPLC法比较，无显著差异(P>0.05)。结果见附表。

附表　头孢曲松钠含量的测定结果

批　号	比色法(%)	HPLC法(%)
940087	89.78	88.12
940808	87.31	88.06
940809	91.18	90.09

(原载《白云医药信息》1995年第3期)

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