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用于蛋白质、低聚物和高分子的分析和提纯
2 孔径为300Å,用于蛋白质大分子(分子量大于15,000),低聚物和高分子的分析;
2 在pH1.5-10范围内稳定使用3000小时;
2 分析、纯化过程中不改变蛋白质分子的;
2 有5µ,10µ,15µ的固定相可供选择;
2 每根5µ的柱子都有出产测试谱图。
峰型锐利效能高
JupiterTM 设计用来分析和纯化蛋白质和大分子物质。超纯硅胶(99.99%)和致密的键合相使峰型变得更加锐利,并且几乎对分离的蛋白质没有特殊的吸附。致密的键合相和较大的硅胶表面积使得JupiterTM 柱能够承受更高的样品负荷。峰形锐利的峰形,对蛋白质没有特殊的破坏性吸收使得JupiterTM柱成为极佳的生物分析提纯柱。
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(P137,F1) 肽类激素
规格: 250×4.6mm
流动相: A:0.1%三氟乙酸水溶液
B:0.1%三氟乙酸溶于乙腈/水(90:10)
梯度: a)8min内A/B(90:10)到A/B(74:26)(B每分钟增加2%)
b)6min内A/B(74:26)到A/B(70:30)(B每分钟增加0.57%)
流速: 1.0mL/min
检测: UV@214nm
样品: 1. 8-精催产素(半胱-酪-异亮-谷酰胺-天门冬酰胺-半胱-脯-精-甘-NH2)
2. 血管加压素(半胱-酪-苯丙-谷酰胺-天门冬酰胺-半胱-脯-精-甘-NH2)
3. 4-丝-8-异亮催产素(半胱-酪-异亮-丝-天门冬酰胺-半胱-脯-异亮-精-NH2)
4. 催产素(半胱-酪-异亮-谷酰胺-天门冬酰胺-半胱-脯-亮-甘-NH2)
在pH1.5-10中稳定
JupiterTM特殊的键合工艺获得了高键合率和键合匀称性,另外,致密的键合也使得JupiterTM柱在pH1.5-10的范围内有3000小时的使用寿命,对pH值的宽广适应性使得JupiterTM柱更容易洗脱含蛋白生物活性剂的流动相。
低三氟乙酸条件
当使用ESI把样品组分导入质谱系统时,三氟乙酸的存在实际上是一种缺陷。三氟乙酸在常规的工作浓度(0.1%)时,由于它作为竞争离子,形成粒子对的能力较强,使得质谱系统中样品离子化的程度降低。所以,三氟乙酸的存在虽然改变了峰的形状,但明显降低了LC/ESI-MS系统的灵敏度。而JupiterTM柱,在三氟乙酸只含0.01%的条件下,对蛋白质的分离也能也能得到很好的峰形。
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(P138,F1)蛋白质在0.1%三氟乙酸下运行
柱子: Jupiter 5μ C4 300Å
规格: 250×4.6mm
货号: 00G-4167-E0
流速: 1.0mL/min
流动相: A:0.1%三氟乙酸水溶液
B:0.1%三氟乙酸溶于乙腈
梯度: 20min内A/B(75:25)到A/B(5:95)
检测: UV@214nm
温度: 35℃
样品: 1.胰岛素
2.胰蛋白酶原
3.乳清蛋白
4.肌红蛋白
5.碳酸酐酶
快速LC/MC分析
2 降低分析时间,溶剂使用量和色谱柱平衡时间,在某些应用上可以降低70%左右。
2 虽然样品的通过速率增加了大概70%。但是保持了保留很好的灵敏度、分辨率和质谱数据的精度。
以下是用JupiterTM 5µ300ÅLC/MC 50×2.0柱和Jupiter 5µ300Å250×2.0mm柱,做蛋白质和多肽样品的分析比较。
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(P138,F2)蛋白质在0.1%三氟乙酸下运行
柱子: JupiterTM 5μ C4 300Å
规格: 250×4.6mm
货号: 00G-4167-E0
流速: 1.0mL/min
流动相: A:0.01%三氟乙酸水溶液
B:0.01%三氟乙酸溶于乙腈
梯度: 20min内A/B(75:25)到A/B(5:95)
检测: UV@214nm
温度: 35℃
样品: 1.胰岛素
2.胰蛋白酶原
3.乳清蛋白
4.肌红蛋白
5.碳酸酐酶
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(P138,F3、4)LC/MS(C18)
样品: 1.细胞色素C
2.小牛血清蛋白
3.肌红蛋白
质谱: HP5989
扫描范围:在1秒内500-1800
A:
柱子: Jupiter 5μ C18 300Å
规格: 250×2.0mm
货号: 00G-4053-B0
流速: 0.2mL/min
流动相: A:0.1%三氟乙酸水溶液
B:0.1%三氟乙酸溶于乙腈
梯度: 60min内A/B(95:5)到A/B(5:95)
B:
柱子: Jupiter 5μC18 300Å
规格: 50×2.0mm
货号: 00G-4053-B0
流速: 0.2mL/min
流动相: A:0.1%三氟乙酸水溶液
B:0.1%三氟乙酸溶于乙腈
梯度: 45min内A/B(95:5)到A/B(5:95)
节省70%的分析时间
2 减少溶剂用量和柱子成本;
2 使用快速梯度洗脱时有很好的分辨率;
2 用于建立方法的一款很好的柱子。
例如多肽之类的大分子用反相色谱柱分离的机理首先是吸附和解吸,大部分的多肽在流动相中的有机含量未达到某一程度时,均被保留在色谱柱上;只要有机溶剂浓度到达时,就会被快速的洗脱下来。因此,溶剂组成轻微的变化对多肽洗脱的保留时间有戏剧性的影响,当使用短柱子时(50mm),希望分析时间减短,就特别需要快速变化的梯度来达到洗脱所需要的有机物含量。以下是分别使用长柱子(250mm)和短柱子(50mm)来分离多肽的对比图。
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(P139,F1)蛋白质使用Jupiter C18分析
柱子: Jupiter 5μ C18 300Å
检测: UV@220nm
流速: 1.0mL/min
进样量: 5μL
样品: 1.碱性磷酸盐
2.氰钴胺素
3.核糖核酸
4.胰岛素
5.铁(传递)蛋白
6.胰蛋白酶阻化剂
A:
规格: 250×4.6mm
货号: 00G-4053-E0
流动相: A:0.1%三氟乙酸水溶液
B:0.1%三氟乙酸溶于乙腈
梯度: a)7min内A/B(95:5)到A/B(74:26)(B每分钟减少3%)
b)3min内A/B(74:26)到A/B(66:34)(B每分钟减少2.67%)
c)10min内A/B(66:34)到A/B(46:54)(B每分钟减少2%)
B:
规格: 50×4.6mm
货号: 00B-4053-E0
流动相: A:0.1%三氟乙酸水溶液
B:0.1%三氟乙酸溶于乙腈
梯度: a)1min内A/B(100:0)到A/B(80:20)(B每分钟减少20%)
b)1.5min内A/B(80:20)到A/B(65:35)(B每分钟减少10%)
c)1.5min内A/B(65:35)到A/B(53.5:46.5)(B每分钟减少7.67%)
d)2min内A/B(53.5:46.5)到A/B(53.5:46.5)(B恒定)
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(P139,F2)蛋白质使用Jupiter C4分析
柱子: Jupiter 5μ C4 300Å
流速: 1.0mL/min
检测: UV@220nm
进样量:5μL
样品: 1.碱性磷酸盐
2.氰钴胺素
3.核糖核酸
4.胰岛素
5.铁(传递)蛋白
6.胰蛋白酶阻化剂
A:
规格: 250×4.6mm
货号: 00G-4167-E0
流动相: A:0.1%三氟乙酸水溶液
B:0.1%三氟乙酸溶于乙腈
梯度: a)7min内A/B(95:5)到A/B(74:26)(B每分钟减少3%)
b)3min内A/B(74:26)到A/B(66:34)(B每分钟减少2.67%)
c)10min内A/B(66:34)到A/B(46:54)(B每分钟减少2%)
B:
规格: 50×4.6mm
货号: 00B-4167-E0
流动相:A:0.1%三氟乙酸水溶液
B:0.1%三氟乙酸溶于乙腈
梯度: a)1min内A/B(100:0)到A/B(80:20)(B每分钟减少20%)
b)1.5min内A/B(80:20)到A/B(65:35)(B每分钟减少10%)
c)1.5min内A/B(65:35)到A/B(53.5:46.5)(B每分钟减少7.67%)
d)2min内A/B(53.5:46.5)到A/B(53.5:46.5)(B恒定)
质量保证
在柱子的整个生产过程当中,产品质量是被严格跟踪而得到保证的。
每一根5µ的JupiterTM柱子都有一份分析认证书。认证书所含的内容包括每一批次
Jupiter柱的填料检测结果,保证柱子间和批次间的稳定性和重现性。以下是每根5?JupiterTM柱子的测试信息。
l 颗粒分析
-粒径
-孔径
-粒径分布
-比表面积
l 总金属残留含量
l 键合率
-总含碳量
-表面覆盖率
l 出厂测试
-稳定性
-金属敏感度
-疏水性
-蛋白质标准测试
-长效性测试(pH稳地性)
-电子扫描显微镜测试(测量表面光滑度和颗粒形状)
重现性
以下是JupiterTM柱对不同物种的细胞色素C分离的谱图,用于测试不同批次产品之间的重现性。
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(P140,F1)蛋白质
柱子: JupiterTM 5μ C18 300Å
规格: 250×4.6mm
货号: 00G-4053-E0
流动相: A:0.1%三氟乙酸水溶液
B:0.1%三氟乙酸溶于乙腈
梯度: 15min内A/B(75:25)到A/B(45:55)(B每分钟增加2%)
流速: 1.0mL/min
检测: UV@220nm
样品: 1.马细胞色素C
2.牛细胞色素C
3.狗细胞色素C
毛细柱
2
0.30mm,0.50mm,0.70mm内径的高效玻璃衬里柱;
2
对微量样品分析的高灵敏度;
2
填充与JupiterTM分析柱一致的填料,便于分析方法的移植应用;
2
在LC/MS系统中稳定的表现并且适于多种梯度条件;
2
1/8英寸(3mm)的外套柱管具有很高的强度和耐用性。
用Jupiter?填料的液相色谱毛细柱除了具有常规尺寸分析柱的特性外,提高了对微量样品分析的灵敏度。Jupiter毛细管柱所用的硅胶填料球形度高,表面光滑,保证它的柱效很高并且可以稳定使用较长时间。高纯的硅胶和特殊的键合工艺使得硅胶表面的键合非常致密,因而Jupiter?毛细柱中残留的硅醇基团不足以干扰样品的保留和洗脱,对分离峰形的影响降到了最低程度。
半制备和制备柱
2
使用JupiterTM5µ产品的键合技术生产10µ,15µ硅胶基体填料;
2
填料球形度好,表面光滑,机械强度高;
2
统一的孔径结构,高负载量;
2
高pH稳定性,易于柱清洗
Jupiter?柱使用的是相同工艺的硅胶键合填料,粒径为10µ和15µ,如果在制备产品中混入其它粒径的填料(例如3µ和5µ),在分离过程中,将很容易察觉到这些变化。
需要的填料较少
JupiterTM制备柱的填料粒子密度非常小,这意味着只需要用较少的填料来填充柱子,对于大量的制备系统来说,可以省下相当的操作费用。
寿命长
优异的硅胶和键合技术使得Jupiter?柱子的使用寿命更长,在pH1.5-10的范围内使用,只要及时清洗柱子,就可以增加柱子的使用时间。
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(P142,F1)阳离子肽标准物
柱子: Jupiter 5μ C18 300Å
规格: 250×4.6mm
货号: 00G-4053-E0
流速: 1.0mL/min
流动相:A:0.1%三氟乙酸水溶液
B:0.1%三氟乙酸溶于乙腈
梯度: 20min内A/B(100:0)到A/B(60:40)(B每分钟增加2%)
检测: UV@210nm
样品: 1. +1锕-甘-甘-甘-亮-甘-甘-丙-甘-甘-亮-赖-酰胺
2. +2锕-赖-酪-甘-亮-甘-甘-丙-甘-甘-亮-赖-酰胺
3. +3锕-甘-甘-丙-亮-赖-丙-亮-赖-甘-亮-赖-酰胺
4. +4锕-赖-酪-丙-亮-赖-丙-亮-赖-甘-亮-赖-酰胺
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(P142,F2)蛋白质
柱子: Jupiter 5μ C4 300Å
规格: 50×4.6mm
货号: 00B-4167-E0
流速: 1.0mL/min
流动相: A:0.1%三氟乙酸水溶液
B:0.1%三氟乙酸溶于乙腈
梯度: a)1min内A/B(100:0)到A/B(80:20)(B每分钟减少20%)
b)1.5min内A/B(80:20)到A/B(65:35)(B每分钟减少10%)
c)1.5min内A/B(65:35)到A/B(53.5:46.5)(B每分钟减少7.67%)
d)2min内A/B(53.5:46.5)到A/B(53.5:46.5)(B恒定)
检测: UV@220nm
样品: 1.碱性磷酸盐
2.氰钴胺素
3.核糖核酸
4.胰岛素
5.铁(传递)蛋白
6.胰蛋白酶受阻剂
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(P142,F3)生物活性肽
柱子: Jupiter 5μ C18 300Å
规格: 250×4.6mm
货号: 00G-4167-E0
流速: 1.0mL/min
流动相: A:20mM KH2PO4,pH4.0
B:乙腈
梯度: a)5min内A/B(95:5)到A/B(80:20)
b)13min内A/B(80:20)到A/B(60:40)
检测: UV@214nm
样品: 1.(血管)舒缓激肽
2.神经降压素
3.蛙皮素
4.Eledoisin
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