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Jupiter

用于蛋白质、低聚物和高分子的分析和提纯

2   孔径为300Å,用于蛋白质大分子(分子量大于15,000),低聚物和高分子的分析;

2   pH1.5-10范围内稳定使用3000小时;

2  分析、纯化过程中不改变蛋白质分子的;

2  5µ,10µ,15µ的固定相可供选择;

2   每根5µ的柱子都有出产测试谱图。

峰型锐利效能高

JupiterTM  设计用来分析和纯化蛋白质和大分子物质。超纯硅胶(99.99%)和致密的键合相使峰型变得更加锐利,并且几乎对分离的蛋白质没有特殊的吸附。致密的键合相和较大的硅胶表面积使得JupiterTM  柱能够承受更高的样品负荷。峰形锐利的峰形,对蛋白质没有特殊的破坏性吸收使得JupiterTM柱成为极佳的生物分析提纯柱。

PICTURE

(P137F1)  肽类激素

规格:   250×4.6mm

流动相: A:0.1%三氟乙酸水溶液

B:0.1%三氟乙酸溶于乙腈/(90:10)

梯度:   a)8minA/B(90:10)A/B(74:26)(B每分钟增加2%)

b)6minA/B(74:26)A/B(70:30)(B每分钟增加0.57%)

流速:   1.0mL/min

检测:   UV@214nm

样品:   1. 8-精催产素(半胱--异亮-谷酰胺-天门冬酰胺-半胱----NH2)           

2. 血管加压素(半胱--苯丙-谷酰胺-天门冬酰胺-半胱----NH2)

3. 4--8-异亮催产素(半胱--异亮--天门冬酰胺-半胱--异亮--NH2)

4. 催产素(半胱--异亮-谷酰胺-天门冬酰胺-半胱----NH2)

pH1.5-10中稳定

JupiterTM特殊的键合工艺获得了高键合率和键合匀称性,另外,致密的键合也使得JupiterTM柱在pH1.5-10的范围内有3000小时的使用寿命,对pH值的宽广适应性使得JupiterTM柱更容易洗脱含蛋白生物活性剂的流动相。

低三氟乙酸条件

当使用ESI把样品组分导入质谱系统时,三氟乙酸的存在实际上是一种缺陷。三氟乙酸在常规的工作浓度(0.1%)时,由于它作为竞争离子,形成粒子对的能力较强,使得质谱系统中样品离子化的程度降低。所以,三氟乙酸的存在虽然改变了峰的形状,但明显降低了LC/ESI-MS系统的灵敏度。而JupiterTM柱,在三氟乙酸只含0.01%的条件下,对蛋白质的分离也能也能得到很好的峰形。

PICTURE

(P138F1)蛋白质在0.1%三氟乙酸下运行

柱子:  Jupiter 5μ C4 300Å

规格:  250×4.6mm

货号:  00G-4167-E0

流速:  1.0mL/min

流动相: A:0.1%三氟乙酸水溶液

       B:0.1%三氟乙酸溶于乙腈

梯度:  20minA/B(75:25)A/B(5:95)

检测:  UV@214nm

温度:  35

样品:  1.胰岛素

       2.胰蛋白酶原

       3.乳清蛋白

       4.肌红蛋白

       5.碳酸酐酶

快速LC/MC分析

2   降低分析时间,溶剂使用量和色谱柱平衡时间,在某些应用上可以降低70%左右。

2    虽然样品的通过速率增加了大概70%。但是保持了保留很好的灵敏度、分辨率和质谱数据的精度。

以下是用JupiterTM 5µ300ÅLC/MC 50×2.0柱和Jupiter 5µ300Å250×2.0mm柱,做蛋白质和多肽样品的分析比较。

PICTURE

(P138F2)蛋白质在0.1%三氟乙酸下运行

柱子:   JupiterTM 5μ C4 300Å

规格:   250×4.6mm

货号:   00G-4167-E0

流速:   1.0mL/min

流动相: A:0.01%三氟乙酸水溶液

        B:0.01%三氟乙酸溶于乙腈

梯度:   20minA/B(75:25)A/B(5:95)

检测:   UV@214nm

温度:   35

样品:   1.胰岛素

2.胰蛋白酶原

3.乳清蛋白

4.肌红蛋白

5.碳酸酐酶

PICTURE

(P138F34)LC/MS(C18)

样品:   1.细胞色素C

2.小牛血清蛋白

3.肌红蛋白

质谱:    HP5989

扫描范围:1秒内500-1800

A:

柱子:   Jupiter 5μ C18 300Å

规格:   250×2.0mm

货号:   00G-4053-B0

流速:   0.2mL/min

流动相: A:0.1%三氟乙酸水溶液

B:0.1%三氟乙酸溶于乙腈

梯度:   60minA/B(95:5)A/B(5:95)

B:

柱子:   Jupiter 5μC18 300Å

规格:   50×2.0mm

货号:   00G-4053-B0

流速:   0.2mL/min

流动相: A:0.1%三氟乙酸水溶液

        B:0.1%三氟乙酸溶于乙腈

梯度:   45minA/B(95:5)A/B(5:95)

节省70%的分析时间

2   减少溶剂用量和柱子成本;

2   使用快速梯度洗脱时有很好的分辨率;

2   用于建立方法的一款很好的柱子。

例如多肽之类的大分子用反相色谱柱分离的机理首先是吸附和解吸,大部分的多肽在流动相中的有机含量未达到某一程度时,均被保留在色谱柱上;只要有机溶剂浓度到达时,就会被快速的洗脱下来。因此,溶剂组成轻微的变化对多肽洗脱的保留时间有戏剧性的影响,当使用短柱子时(50mm),希望分析时间减短,就特别需要快速变化的梯度来达到洗脱所需要的有机物含量。以下是分别使用长柱子(250mm)和短柱子(50mm)来分离多肽的对比图。

PICTURE

(P139F1)蛋白质使用Jupiter C18分析

柱子:   Jupiter 5μ C18 300Å

检测:   UV@220nm

流速:   1.0mL/min

进样量: 5μL

样品:   1.碱性磷酸盐

2.氰钴胺素

3.核糖核酸

4.胰岛素

5.(传递)蛋白

6.胰蛋白酶阻化剂

A:

规格:   250×4.6mm

货号:   00G-4053-E0

流动相: A:0.1%三氟乙酸水溶液

B:0.1%三氟乙酸溶于乙腈

梯度:   a)7minA/B(95:5)A/B(74:26)(B每分钟减少3%)

b)3minA/B(74:26)A/B(66:34)(B每分钟减少2.67%)

c)10minA/B(66:34)A/B(46:54)(B每分钟减少2%)

B:

规格:   50×4.6mm

货号:   00B-4053-E0

流动相: A:0.1%三氟乙酸水溶液

B:0.1%三氟乙酸溶于乙腈

梯度:   a)1minA/B(100:0)A/B(80:20)(B每分钟减少20%)

b)1.5minA/B(80:20)A/B(65:35)(B每分钟减少10%)

c)1.5minA/B(65:35)A/B(53.5:46.5)(B每分钟减少7.67%)

d)2minA/B(53.5:46.5)A/B(53.5:46.5)(B恒定)

PICTURE

(P139F2)蛋白质使用Jupiter C4分析

柱子:  Jupiter 5μ C4 300Å

流速:  1.0mL/min

检测:  UV@220nm

进样量:5μL

样品:  1.碱性磷酸盐

       2.氰钴胺素

       3.核糖核酸

       4.胰岛素

       5.(传递)蛋白

       6.胰蛋白酶阻化剂

A:

规格:  250×4.6mm

货号:  00G-4167-E0

流动相: A:0.1%三氟乙酸水溶液

       B:0.1%三氟乙酸溶于乙腈

梯度:   a)7minA/B(95:5)A/B(74:26)(B每分钟减少3%)

       b)3minA/B(74:26)A/B(66:34)(B每分钟减少2.67%)

       c)10minA/B(66:34)A/B(46:54)(B每分钟减少2%)

B:

规格:  50×4.6mm

货号:  00B-4167-E0

流动相:A:0.1%三氟乙酸水溶液

       B:0.1%三氟乙酸溶于乙腈

梯度:  a)1minA/B(100:0)A/B(80:20)(B每分钟减少20%)

       b)1.5minA/B(80:20)A/B(65:35)(B每分钟减少10%)

       c)1.5minA/B(65:35)A/B(53.5:46.5)(B每分钟减少7.67%)

       d)2minA/B(53.5:46.5)A/B(53.5:46.5)(B恒定)

质量保证

在柱子的整个生产过程当中,产品质量是被严格跟踪而得到保证的。

每一根5µ的JupiterTM柱子都有一份分析认证书。认证书所含的内容包括每一批次

Jupiter柱的填料检测结果,保证柱子间和批次间的稳定性和重现性。以下是每根5?JupiterTM柱子的测试信息。

l  颗粒分析

-粒径

-孔径

-粒径分布

-比表面积

l    总金属残留含量

l   键合率

-总含碳量

-表面覆盖率

l  出厂测试

-稳定性

-金属敏感度

-疏水性

-蛋白质标准测试

-长效性测试(pH稳地性)

-电子扫描显微镜测试(测量表面光滑度和颗粒形状)

重现性

以下是JupiterTM柱对不同物种的细胞色素C分离的谱图,用于测试不同批次产品之间的重现性。

PICTURE

(P140F1)蛋白质

柱子:  JupiterTM 5μ C18 300Å

规格:  250×4.6mm

货号:  00G-4053-E0

流动相: A:0.1%三氟乙酸水溶液

       B:0.1%三氟乙酸溶于乙腈

梯度:  15minA/B(75:25)A/B(45:55)(B每分钟增加2%)

流速:  1.0mL/min

检测:  UV@220nm

样品:  1.马细胞色素C

       2.牛细胞色素C

       3.狗细胞色素C

毛细柱

2        0.30mm0.50mm0.70mm内径的高效玻璃衬里柱;

2        对微量样品分析的高灵敏度;

2        填充与JupiterTM分析柱一致的填料,便于分析方法的移植应用;

2        LC/MS系统中稳定的表现并且适于多种梯度条件;

2        1/8英寸(3mm)的外套柱管具有很高的强度和耐用性。

Jupiter?填料的液相色谱毛细柱除了具有常规尺寸分析柱的特性外,提高了对微量样品分析的灵敏度。Jupiter毛细管柱所用的硅胶填料球形度高,表面光滑,保证它的柱效很高并且可以稳定使用较长时间。高纯的硅胶和特殊的键合工艺使得硅胶表面的键合非常致密,因而Jupiter?毛细柱中残留的硅醇基团不足以干扰样品的保留和洗脱,对分离峰形的影响降到了最低程度。

半制备和制备柱

2        使用JupiterTM5µ产品的键合技术生产10µ,15µ硅胶基体填料;

2        填料球形度好,表面光滑,机械强度高;

2        统一的孔径结构,高负载量;

2        pH稳定性,易于柱清洗

Jupiter?柱使用的是相同工艺的硅胶键合填料,粒径为10µ和15µ,如果在制备产品中混入其它粒径的填料(例如3µ和5µ),在分离过程中,将很容易察觉到这些变化。

需要的填料较少

       JupiterTM制备柱的填料粒子密度非常小,这意味着只需要用较少的填料来填充柱子,对于大量的制备系统来说,可以省下相当的操作费用。

寿命长

优异的硅胶和键合技术使得Jupiter?柱子的使用寿命更长,在pH1.5-10的范围内使用,只要及时清洗柱子,就可以增加柱子的使用时间。

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(P142F1)阳离子肽标准物

柱子:  Jupiter 5μ C18 300Å

规格:  250×4.6mm

货号:  00G-4053-E0

流速:  1.0mL/min

流动相:A:0.1%三氟乙酸水溶液

       B:0.1%三氟乙酸溶于乙腈

梯度:  20minA/B(100:0)A/B(60:40)(B每分钟增加2%)

检测:  UV@210nm

样品:  1. +1------------酰胺

       2. +2------------酰胺

       3. +3------------酰胺

       4. +4------------酰胺

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(P142F2)蛋白质

柱子:  Jupiter 5μ C4 300Å

规格:  50×4.6mm

货号:  00B-4167-E0

流速:  1.0mL/min

流动相: A:0.1%三氟乙酸水溶液

       B:0.1%三氟乙酸溶于乙腈

梯度:  a)1minA/B(100:0)A/B(80:20)(B每分钟减少20%)

       b)1.5minA/B(80:20)A/B(65:35)(B每分钟减少10%)

       c)1.5minA/B(65:35)A/B(53.5:46.5)(B每分钟减少7.67%)

       d)2minA/B(53.5:46.5)A/B(53.5:46.5)(B恒定)

检测:  UV@220nm

样品:  1.碱性磷酸盐

       2.氰钴胺素

       3.核糖核酸

       4.胰岛素

       5.(传递)蛋白

       6.胰蛋白酶受阻剂

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(P142F3)生物活性肽

柱子:  Jupiter 5μ C18 300Å

规格:  250×4.6mm

货号:  00G-4167-E0

流速:  1.0mL/min

流动相: A:20mM KH2PO4pH4.0

       B:乙腈

梯度:   a)5minA/B(95:5)A/B(80:20)

       b)13minA/B(80:20)A/B(60:40)

检测:   UV@214nm

样品:   1.(血管)舒缓激肽

        2.神经降压素

        3.蛙皮素

        4.Eledoisin