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用于对反相HPLC方法的开发和改进
(p248 f1)
Synergi Hydro-Rp
C18，极性封端
Synergi Max-RP
C12，三甲基硅氧烷封端
Synergi Polar-RP
键合醚苯基，极性封端
(p248 t1)
填料特性
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填料形状/粒度（?）
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孔径
（?）
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空容
（mL/g）
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比表面积
(m2/g)
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载碳量
%
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封尾
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Max-RP
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Spher. 4,10
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80
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1.05
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475
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15
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三甲基硅氧烷
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Hydro-RP
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Spher. 4,10
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80
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1.05
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475
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15
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极性基团
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Polar-RP
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Spher. 4,10
|
80
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1.05
|
475
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15
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极性基团
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SynergiTM Max-RP柱
●C12烷基官能团键合相，TMS封端；
●特别适用于中等极性到非极性组分的分析；
●更宽的pH值的应用范围。
优点：
●完全适用于各种反相分离应用的开发；
●即使在pH7.0条件下，碱性化合物也能获得理想的峰形；
●4?、80 ?填料提供比5?填料更高的柱效，比3?填料更低的柱压。
SynergiTM Hydro-RP柱（新产品）
特有极性封端的Synergi C18柱，不仅适合分离非极性、强极性化合物，而且对不同极性条件的混合物也能提供优异的分离效果。
优点：
●强疏水性的C18官能团；
●对极性、烷基化合物有很好的保留；
●4?、80 ?硅胶基体填料，有比5?的C18柱更高的柱效；
●在100%的水性流动相中表现稳定。
SynergiTM Polar-RP柱
极性基团封端，醚-苯基键合相，适用于强极性组分的分离。
优点：
●完全的极性基团封端；
●对强极性化合物表现出更好的保留；
●醚苯基官能团和极性封端提升了在酸性和碱性环境下的峰形；
●对芳香族药物具有独特的选择性；
●在100%水性流动相中表现稳定。
SynergiTM Column Selector
●应用于调整和开发新的HPLC方法；
●便于确定方法中最佳的HPLC柱尺寸以及键合相类型；
●优化HPLC方法。
(P249)
超高纯度，B型碱性去活硅胶
SynergiTM 系列产品是基于孔径为80 Å的超高纯度（>99.99%）、低碱活性的B型硅胶制成的，保证了极低的可与金属进行螯合作用的表面面积，降低了中性pH条件下硅醇基的酸度。以前使用的A型硅胶含有较高的金属含量，容易造成某些组分由于与金属离子螯进而降低了分离效果，或者造成峰的拖尾。
(p249 f1) 图1 SynergiTM Polar-RP vs. 传统C18色谱柱
色谱柱：①SynergiTM 4? Polar-RP
②Hypersil? 5? ODS
规格：150×4.6mm
流动相：水/乙腈 （50:50）
流速：1.0mL/min
检测：紫外@230nm
温度：室温
进样量：5µL
样品：1. 2,7-二羟基萘
2. 2,3-二羟基萘
高效的4µ硅胶填料
SynergiTM 的Max-RP柱和Polar-RP柱均采用4?硅胶作为键合基质。4?键合填料的柱效不但优于5?产品，而且在使用中产生的压力损失和5µ柱子相似。
80 Å的填料孔径提供了更高的键合及反应表面积
Synergi? 4?液相色谱柱具有很高的比表面积（475m2/g），高比表面积增强了样品组分与键合相的作用。对于极性类样品的分析，高的比表面积使样品组分与疏水性的C18官能团之间的反应获得了足够的反应空间，提高极性组分的保留特性。Synergi? Hydro-RP比较其它 C18色谱柱，在极性化合物分析的拓广正是得益于其新颖的填料特性。
在对SynergiTM Polar-RP的测试中，样品中的亲水性和疏水性组分均获得了良好的分离效果（图3），肯定了提高比表面积对于抑制疏水性功能团的作用，。
(p249 f2) 图2 SynergiTM Hydro-RP vs. 传统C18色谱柱
色谱柱：①SynergiTM柱 4µ Hydro-RP
②Waters® Symmetry® 5? C18
规格：150×4.6mm
流动相：A. 0.1%磷酸水溶液
B. 0.1%含磷酸的乙腈溶液
梯度条件：A/B, 90:10 to 75:25 in 20 min
流速：1.5mL/min
检测：紫外@330nm
温度：室温
进样量：25?L海胆提取液
样品：1. 不明杂质
2. Caftaric acid
3. 绿原酸
4. 海胆苷
(p248 f3) 图3 SynergiTM Polar-RP vs. 内嵌极性基团的C18色谱柱
色谱柱：①SynergiTM柱 4µ Polar-RP
②Waters® SymmetryShieldTM 5µ C18
规格：150×4.6mm
流动相：甲醇/20mM 磷酸二氢钾溶液 pH6.5 (35:65)
流速：1.5mL/min
检测：紫外@210nm
温度：室温
进样量：1µL
样品：1. 脱羟肾上腺素（新福林）(1µg)
2. 苯丙胺醇 (1µg)
3. 假麻黄碱 (1µg)
4. 羟苯甲酸甲酯 (1?g)
(P250)
SynergiTM Max-RP
中性条件时，使碱性化合物仍能得到极好峰形的C12柱。
由于硅醇基表面去活，SynergiTM Max-RP在对碱性物质的分析中，也能得到对称的峰形。
(p250 f4) 图4 中性条件下的使用
抗抑郁剂类
色谱柱：①SynergiTM 4µ Max-RP
②Waters® Symmetry® 5Å C18
规格：150×4.6mm
流动相：甲醇/乙腈/20mM 磷酸二氢钾溶液 pH7.0 (35:35:30)
流速：2.0mL/min
检测：紫外@254nm
温度：30℃
进样量：1µL
样品：1. 去甲丙咪嗪
2. 丙咪嗪
3. 去甲替林
4. 阿米妥林
5. 氯丙咪嗪
SynergiTM 4µ Max-RP在液相/质谱联用系统中有极好的应用：Synergi? 4?的填料粒径和超高纯度的硅胶使得该产品在分离碱性组分时具有很高的柱效和极好的峰形，而且能够很好地适应各种液/质联用中的流动相改性剂（如三氟乙酸，甲酸，乙酸等）。虽然Synergi? Max-RP使用4?填料，但是却具有3.5?填料的柱效和更低的柱压。
(p250 f5) 图5 使用液/质联用流动相改性剂时的应用
解热镇痛类药物
0.1%甲酸
0.1%乙酸
0.1%三氟乙酸
色谱柱：SynergiTM 4µ Max-RP
规格：50×4.6mm
流动相：A. 0.1%三氟乙酸、甲酸或乙酸的水溶液
B. 含0.1%三氟乙酸、甲酸或乙酸的乙腈溶液
梯度条件：A/B, 95:5 to 100%B in 5 min
流速：1.5mL/min
检测：紫外@254nm
温度：30℃
进样量：5?L
样品：1. 硫脲 (0.25µg)
2. 可代因 (1µg)
3. 扑尔敏 (2µg)
4. 普萘洛尔 (6µg)
5. 去甲丙咪嗪 (0.5µg)
6. 布洛芬 (6µg)
(p250 f6) 图6 3.5µ与色谱柱的柱压及柱效比较
激素类
SynergiTM柱 4µ Max-RP的使用柱压=160bar
Zorbax® 3.5µ SB-C18的使用柱压=216bar
Symmetry® 3.5µ C18 的使用压力=218bar
色谱柱：①SynergiTM柱 4µ Max-RP
②Zorbax® 3.5µ SB-C18
③Waters® Symmetry® 3.5µ C18
规格：50×4.6mm
流动相：A. 0.1%甲酸水溶液
B.含 0.1%甲酸的乙腈溶液
梯度条件：A/B, 95:5 to 5:95 in 4 min
流速：4.0mL/min
检测：紫外@254nm
温度：30℃
进样量：2.5µL
样品：1. 地塞米松 (2.5?g)
2. 氢化可的松 (2.5µg)
3. 11-a-乙酸羟孕酮 (2.5µg)
4. 17-a-乙酸羟孕酮 (2.5µg)
5. 黄体素 (2.5µg)
(P251)
SynergiTM柱 Hydro-RP 新！
从非极性化合物分析延伸到强极性化合物分析的C18柱。
SynergiTM Hydro-RP柱使得从非极性直到强极性范围内的各种化合物的分离变得更加容易。强极性的组分在普通C18柱中的分离一般不易得到满意的结果（见图7~8）。虽然100%的水性流动相可以很好地溶解极性化合物，但是对大多数普遍的C18柱却造成了分离障碍，这种情况下就需要SynergiTM柱 Hydro-RP。SynergiTM柱 Hydro-RP柱在C18键合相中采用极性基团封端，通过极性选择、氢键和电荷作用等产生疏水性保留或极性保留，从而提高了水溶性组分的分离效果。
新型SynergiTM柱 Hydro-RP柱与SynergiTM柱 Polar-RP柱和SynergiTM柱 Max-RP柱一起构成完整的化合物分析体系。
(p251 f7) 图7
氨基酸类
色谱柱：①SynergiTM柱 4µ Hydro-RP
②Waters® Symmetry® 5µ C18
规格：150×4.6mm
流动相：A. 0.1%磷酸溶液
B. 含0.1%磷酸的乙腈溶液
梯度条件：A/B, 90:10 to 75:25B in 20 min
流速：1.5mL/min
检测：紫外@330nm
温度：室温
进样量：25µL海胆提取液
样品：1. 不明杂质
2. Caftaric acid
3. 氯原酸
4. 海胆苷
(p251 f8) 图8
肾上腺素受体阻滞剂
色谱柱：①SynergiTM 4µ Hydro-RP
②Zorbax® Eclipse® XDB 5µ
规格：150×4.6mm
流动相：A. 10mM三乙胺甲酯 (pH 6.0)
B. 含10mM三乙胺甲酯的乙腈溶液
梯度条件：15% B to 65%B in 15 min
流速：1.5mL/min
检测：紫外@230nm
温度：室温
进样量：1µL ?-肾上腺素受体阻滞剂混合品（1µg/µL）
样品：1. 阿替洛尔
2. 吲哚洛尔
3. 纳多洛尔
4. 醋丁洛尔
5. 美托洛尔
6. 拉贝洛尔
(P252)
针对极性化合物的保留作用
SynergiTM Hydro-RP 475m2/g的比表面积源于其使用的80 Å的孔径。高比表面积保证了组分和键合相之间具有足够的反应空间，加强了疏水保留和极性保留。图9显示了SynergiTM柱 Hydro-RP对于有机酸类的分离情况；相反在普通C18柱中，由于极性基团对于C18官能团与组分非极性中心的选择作用的抑制，就很难达到这样的分离效果。
(p252 f9) 图9 Synergi? Hydro-RP 对有机酸的分离
色谱柱：SynergiTM柱 4µ Hydro-RP
规格：250×4.6mm
流动相：20mM磷酸二氢钾溶液 (pH 2.9)
流速：0.7mL/min
检测：紫外@220nm
温度：22℃
样品：1. 草酸
2. 酒石酸
3. 甘醇酸
4. 甲酸
5. 丙酮酸
6. 丙二酸
7. 乙酸
8. 马来酐
9. 柠檬酸
在100%水性流动相中的稳定性
在C18柱的应用中使用100%的水性流动相虽然能够改善对性化合物的保留，但是普通的C18官能团很难被高水性的流动相润湿，使得C18链在硅胶表面的配位作用下降，相反保留作用却明显地降低。SynergiTM Hydro-RP柱为100%水性流动相的应用做了特别设计，所以SynergiTM 的C18键使得水溶性样品也能够获得正常的保留（见图10）。即使在高水性条件下长时间使用，SynergiTM柱 Hydro-RP仍然可以保持正常的柱效（见图11）。
(p252 f10) 图10 SynergiTM Hydro-RP 在高水性条件下对氧化型和还原型谷胱甘肽的分离
肝损伤治疗药物
色谱柱：SynergiTM 4µ Hydro-RP
规格：150×4.6mm
流动相：20mM磷酸二氢钾溶液 (pH 2.7)/乙腈=99:1
流速：1.0mL/min
检测：紫外@210nm
温度：室温
进样量：1?L氧化型和还原型谷胱甘肽混合品（溶于缓冲液中，浓度各为1mg/mL）
样品：1. 还原型谷胱甘肽（G-SH）
2. 氧化型谷胱甘肽（G-S-S-G）
(p252 f11) 图11 Synergi? Hydro-RP 在100%水性条件下的稳定性测试
神经传递物质（生物胺类）
色谱柱：SynergiTM 4µ Hydro-RP
规格：150×4.6mm
流动相：20mM磷酸二氢钾溶液 (pH 2.5)
流速：1.0mL/min
检测：紫外@210nm
温度：35℃
进样量：5?L
样品：儿茶芬胺
1. 去甲肾上腺素（0.8mg/mL）
2. 肾上腺素（0.5mg/mL）
3. Normetanephrine（0.6ml/mL）
4. 多巴胺（0.4mg/mL）
5. 左旋-多巴（0.3mg/mL）
(P253)
SynergiTM Polar-RP
醚苯基，极性基团封端。
SynergiTM 4µ Polar-RP键合醚苯基，采用极性基团封尾，针对极性类、芳香组化合物有特殊的选择性，因此对于制药工业中的产品分析有广泛的应用。由于其键合相的化学特性，SynergiTM Polar-RP柱表现出其独特而优异的极性选择性，是对SynergiTM柱 Max-RP的一种补充选择。
(p253 f12) 图12 对极性物质的选择和分离
兴奋剂类
色谱柱：①SynergiTM 4µ Polar-RP
②Zorbax® Bonus-RP 5µ
③Waters® SymmetryShieldTM 5µ C18
④Waters® Symmetry® 5µ C18
规格：150×4.6mm
流动相：20mM甲酸铵 (pH 3.5)/甲醇=70:30
流速：1.5mL/min
检测：紫外@210nm
温度：室温
进样量：1?L
样品：1. 苯丙胺醇（PPA）
2. 右旋-安非他命
3. 甲基安非他命
4. 呱芬那辛
(p253 f13) 图13 对极性物质保留的改善
色谱柱：①SynergiTM 4µ Polar-RP
②Luna® C18(2) 3µ
规格：50×4.6mm
流动相：0.1%甲酸水溶液/含0.1%甲酸的甲醇溶液 (60:40)
流速：1.5mL/min
检测：紫外@254nm
温度：30℃
进样量：1µL
样品：1. Thiourea
2. 咖啡因
3. 苯酚
4. 乙酰苯
5. 邻苯二甲酸二甲酯
(P254)
(p254 f14) 图14 对极性物质保留的改善
非固醇类消炎止痛剂
色谱柱：①SynergiTM 4µ Polar-RP
②Luna® C18(2) 5µ
规格：150×4.6mm
流动相：20mM甲酸铵 (pH 3.5)/乙腈=50:50
流速：2.0mL/min
检测：紫外@230nm
温度：25℃
样品：1. 吲哚洛芬
2. 对羟乙基苯甲酸乙脂
3. 甲氯萘丙酸
4. 吲哚美辛
5. 布洛芬
(p254 f15) 图15 对极性物质保留的改善
抗生素
色谱柱：①SynergiTM 4µ Polar-RP
②Waters® XterraTM RP18 5µ
规格：150×4.6mm
流动相：20mM甲酸铵 (pH 3.5)/乙腈=65:35
流速：1.0mL/min
检测：紫外@254nm
温度：25℃
样品：1. 头孢羟氨苄
2. 头孢克洛
3. 头孢氨苄
4. 头孢拉定
5. 头孢唑啉
(p254 f16) 图16 对极性物质保留的改善
肾上腺素类
色谱柱：①SynergiTM 4µ Polar-RP
②Waters® SymmetryShieldTM 5? C18
③Waters® XterraTM RP18 5?
④Waters® Symmetry® 5µ C18
规格：150×4.6mm
流动相：20mM磷酸二氢钾 (pH 3.0)/甲醇=50:50
流速：1.0mL/min
检测：紫外@230nm
温度：室温
进样量：2µL
样品：1. 间羟异丙肾上腺素
2. 吲哚洛尔
3. 美托洛尔
4. 阿普洛尔
5. 普萘洛尔
6. 对羟乙基苯甲酸乙脂
(p254 f17) 图17 对极性物质保留的改善
胃部治疗药
色谱柱：①SynergiTM 4µ Polar-RP
②Zorbax® 5µ SB-Phenyl
③Inertsil® 5µ Phenyl PH-3
④Waters® XterraTM 5? RP18
规格：150×4.6mm
流动相：20mM磷酸盐 (pH 7.0)/乙腈=80:20
流速：1.0mL/min
检测：紫外@254nm
温度：25℃
样品：1. 酒石酸环丁羟吗喃
2. 甲氰咪胍
3. 雷尼替丁
(P255)
在100%缓冲液或水性流动相中的稳定性
在SynergiTM 4µPolar-RP 固定相上键合的醚苯基，不仅改善了对酸碱组分分离的峰形，也在高水性流动相的应用中表现出很好的稳定性（见图18~20）。强极性组分（例如：甲酸等有机酸）很难被烷基键合相保留。如果，使用高水性流动相甚至100%的缓冲盐水溶液，可以 | 